如题所述
第1个回答 2022-07-09
实验目的：获得目的蛋白的粗蛋白，构建反应体系；
表达载体：pLM303；
步骤：
1.挑菌小摇，5 ml，37℃过夜；可保菌；
2.取1 ml加到30 ml LB k+培养基中，37℃，约1.5 h，到OD600约为0.6；
3.取2 ml 作为IPTG加入之前的对照；加入IPTG至终浓度2.5 mM（1 M IPTG母液加75 ul 到30 ml 培养基中），28℃，180 rpm，培养5小时；
4.菌液可以4 ℃保存20天左右；
5.取1 ml超声破碎，取上清，SDS-PAGE检测蛋白是否表达；利用IPTG加入之前的菌液破碎之后的上清作为对照；
表达载体：pLM303；
步骤：
1.挑菌小摇，5 ml，37℃过夜；可保菌；
2.取1 ml加到30 ml LB k+培养基中，37℃，约1.5 h，到OD600约为0.6；
3.取2 ml 作为IPTG加入之前的对照；加入IPTG至终浓度2.5 mM（1 M IPTG母液加75 ul 到30 ml 培养基中），28℃，180 rpm，培养5小时；
4.菌液可以4 ℃保存20天左右；
5.取1 ml超声破碎，取上清，SDS-PAGE检测蛋白是否表达；利用IPTG加入之前的菌液破碎之后的上清作为对照；
