之前一直做诱导表达都有很高的酶活,可是最近做的能从蛋白胶上能看到清晰的目的条带但没有活性,方法都是一样的真是百思不得其解,究竟怎么回事呢,谢谢各位研友的回答
第1个回答 2017-08-14
非变性凝胶里面没加变性剂,一般是SDS。非变性胶跑出来的蛋白能保持其活性一般用做功能试验,如EMSA。由于没有变性剂的原因非变性胶电泳时除了与蛋白分子量有关也会受都电荷的影响,因此对蛋白等电点的确定和缓冲液的酸碱性有注意,有时需要倒转电泳时的正负极。从跑的胶来看,变性胶会比较好看,带比较窄,非变性胶跑出来则比较粗糙。
第2个回答 2017-08-14
GST标签可以增加可溶性,同时避免目的蛋白降解
第3个回答 2017-08-12
GST标签可以增加可溶性,同时避免目的蛋白降解
第4个回答 2017-08-12
可以百度有详细的介绍
第5个回答 2017-08-12
可以百度有详细的介绍