如题所述
第1个回答 2024-06-02
在真核细胞中,约有80%的可溶蛋白在翻译后经过修饰,其N末端的NH2基团通常被封闭,这使得传统的Edman降解方法难以应用。此外,微量蛋白分离过程也可能导致氨基酸末端的非自然封闭。为了准确分析氨基酸序列,首先需要去除这些封闭基团,或者将蛋白内部切断,然后对切割产生的混合物中的各个肽段进行独立测序。这种方法能提供更精确的蛋白鉴定,为后续的分子克隆策略提供更多可能性。
获取蛋白序列数据对于理解DNA序列、确定蛋白质的修饰位置(如酰化、甲基化、糖基化、磷酰化以及信号肽或前序列的切点等)至关重要。这些信息对于解释蛋白质的结构和功能至关重要。通常,通过以下步骤可以获得蛋白质序列:首先,通过化学或酶降解后对蛋白进行纯化;接着,从混合物中分离出内部切割产生的肽段;最后,对这些肽段进行分析和鉴定。
获取蛋白序列数据对于理解DNA序列、确定蛋白质的修饰位置(如酰化、甲基化、糖基化、磷酰化以及信号肽或前序列的切点等)至关重要。这些信息对于解释蛋白质的结构和功能至关重要。通常,通过以下步骤可以获得蛋白质序列:首先,通过化学或酶降解后对蛋白进行纯化;接着,从混合物中分离出内部切割产生的肽段;最后,对这些肽段进行分析和鉴定。