氨基末端分析降解方法

在真核细胞中，约有80%的可溶蛋白在翻译后经过修饰，其N末端的NH2基团通常被封闭，这使得传统的Edman降解方法难以应用。此外，微量蛋白分离过程也可能导致氨基酸末端的非自然封闭。为了准确分析氨基酸序列，首先需要去除这些封闭基团，或者将蛋白内部切断，然后对切割产生的混合物中的各个肽段进行独立测序。这种方法能提供更精确的蛋白鉴定，为后续的分子克隆策略提供更多可能性。

获取蛋白序列数据对于理解DNA序列、确定蛋白质的修饰位置（如酰化、甲基化、糖基化、磷酰化以及信号肽或前序列的切点等）至关重要。这些信息对于解释蛋白质的结构和功能至关重要。通常，通过以下步骤可以获得蛋白质序列：首先，通过化学或酶降解后对蛋白进行纯化；接着，从混合物中分离出内部切割产生的肽段；最后，对这些肽段进行分析和鉴定。