关于pET32a载体构建后,双酶切鉴定不正确求助

如题所述

第1个回答  2017-01-06
一般来说融合蛋白不影响gus的检测,不过影响不影响目的蛋白功能就不一定了。我个人倒是觉得,如果不做定位的的话,gus检测不是那么重要。可以把gus切下去(选用sacI位点)。pcr在基因组合转录组里面都能检测出来就认为目的基因正确表达了。
要注意的是如果不融合的话别忘了CDS是要带终止密码子的。
如果融合,别忘了考虑GUS的读码正确,目的基因CDS后面要把终止密码子去掉。

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