问个问题哦，我进行的是原核蛋白表达，表达载体是PET32a,表达菌液超声后在上清电泳条带很好，可是没有酶活

首先得判断蛋白条带是否正确，因为32a表达过程中，会在目标蛋白上加上部分自己序列，所以电泳图谱中你所要表达的蛋白，应该比你自己预期的大20-30kDa。
其次，原核表达，只是表达了酶蛋白序列，但蛋白序列与酶之间不能划等号，要有一个正确的加工之后形成合适的二、三级结构，蛋白才有活性追问

首先跑的条带确实比我的蛋白大了10kda,是因为形成融合蛋白的原因吗？那我纯化后然后再进行酶切（标签）蛋白会有作用吗？
其次这个问题怎么改进才能有活性呢？

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你了解下你表达的蛋白是个什么情况，有没有修饰，也许不是你处理过程的问题，而是原核表达本身没有活性啊