做水稻转化时，农杆菌挑取单菌落经PCR鉴定后为什么要接连摇菌两次？分别起什么作用？

农杆菌经平板划线复苏，然后挑点培养，再做PCR鉴定，有条带的就可用于第一次摇菌，过12个小时左右变浑浊的吸取一点进行第二次摇菌，这整个过程不是很明白，每一步的目的是什么，有什么作用？帮一下忙啊，谢谢啦！

划线挑单菌落是为了保证细菌的纯度。PCR鉴定保证是含有目的基因的阳性工程菌。前12个小时摇菌活化，第二次摇菌快速扩增直到达到需要的OD值为止。