如题所述
第1个回答 推荐于2016-12-02
设计前blast比对,提醒下这是一个错误的认识,因此,要区别同源比对和验证比对,在对感兴趣的基因设计引物时,用的是同源比对,就是把物种上”近亲“的某个基因序列进行blast alignment,然后找出他们的保守片段,或者保守区间,在保守区间内设计引物,通过出来的成功率较高。这就是意义。
设计引物的步骤:a-同源比对找出保守区或片段,将保守片段复制出来保存为fasta格式;b-NCBI有个primer-blast,输入你复制出来的序列,然后设置你需要扩增的片段长度,点击提交按钮就可以得到候选引物;c-使用primer premier,详细方法网上很多,不再敖述