PCR产物纯化是去除多余的dNTP和引物二聚体。用纯化好的片段连接转化可以降低背景,提高转化效率。通常转化后我们用几种方法来确认转化子,抽质粒酶切是比较可靠的。选择酶切大小与预计一致的克隆去测序。 这里的抽质粒酶切是什么意思?大体怎么操作呢?
第1个回答 2009-11-10
提质粒酶切是检测你是否连接成功的一个手段,因为并不是说跑胶你看到连接成功就肯定是连接成功的,有时候可能连得是非特异片段,所以选择目的片段特有的酶切位点来酶切,进一步确定。一般选用10ul体系即可。
第2个回答 2009-11-09
就是提取质粒DNA,然后用限制酶降解成片段。本回答被提问者采纳