马闻天的诊治判断

如题所述

第1个回答  2016-06-04

1.分类:鸡新城疫病毒(NDV)属副粘性病毒科,副粘病毒属。Tumov等人用与抗原性相关的血凝抑制试验(HI)进行副粘病毒PMV分类,将禽副粘病毒分成9个血清型,其中鸡新城疫病毒属于PMV1型。
2.抗原性:病毒中和试验(VN)或琼脂扩散技术显示不同的NDV毒株存在微小的抗原差异,然而实际上所有NDV不同毒力的NDV表现为单一的相同抗原性。根据这一特点,在ND的免疫预防上,不同来源的疫苗毒株可在不同地区通用。
3.形态:ND病毒颗粒在电镜下呈多形态,大多数近似球形,直径为120-300毫微米,具有双层囊膜,表面具有12-15毫微米的纤突,纤突中具有能刺激宿主产生抑制红细胞凝集素和病毒中和抗体的抗原成分。核衣壳由一条直径为18毫微米的多盘绕的管组成,围绕中央孔心轴呈螺旋对称排列。核衣壳的中央是病毒的核酸。
4.致病力:NDV对鸡的致病力在很大程度上由毒株决定,但也部分取决于感染的剂量、途径,鸡的品种同易感性之间的关系较小。
5.分子生物学特性:NDV由单股RNA单分子组成,分子量约5×106道尔顿,约占病毒颗粒重量的5%,NDV基因组的核苷酸序列显示它由15156个核苷酸组成。病毒颗粒含有脂质的囊膜,平均总分子量约500×106道尔顿,在蔗糖中密度为1.18-1.20g/ml。Alexander(1981)采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,对纯化的NDV裂解后进行电泳,证实病毒含有7种多肽。Samaon证实了NDV基因组共编码6种蛋白。

6.生物学活性:(1)血凝性(HA):NDV毒株因表面含有血凝素蛋白(HN),可与红细胞表面受体相结合而凝集多种动物的红细胞。如两栖类、爬行类、禽类、人、小鼠、豚鼠、牛、羊、猪、马等的红细胞,其中对鸡的红细胞的凝集作用,不同毒株均很稳定。NDV凝集红细胞的特性能被相应抗体抑制。因此目前血凝试验(HA)、血凝抑制试验(HI),已成为该病有效的检测方法。
(2)神经氨酸苷酶活性:所有副粘病毒表面均存在该酶,Huang等人的研究认为此酶与病毒与细胞膜的融合作用有关。
(3)溶血:NDV具有一种溶血素,能溶解它所凝集的红细胞。冻结融解、透析、超声波振动和渗透压骤变,能增强病毒的溶血活性。
7.对环境的抵抗力:NDV对热敏感,100℃,1分钟可被灭活,56℃,5分钟至6小时内可被破坏病毒的感染性、红细胞凝集活性和免疫原性,37℃数小时至数天,20℃、8℃需数月和数年才能使病毒全部失活。NDV在外界环境中的稳定性取决于病毒所处的介质。蛋白质的存在,冻结温度时,对病毒均有保护作用,且能使消毒药品无效。所以在消毒前应进行清洁,在冬季消毒需在加温条件下进行。
8.实验室宿主系统:NDV可以实验性感染许多禽类及非禽类动物。但鸡是该病重要的自然宿主,也是最常用在实验动物。鸡胚:所有NDV可在鸡胚中复制,特别是来自无特定病原的SPF鸡胚已常用来分离和复制病毒。毒力不同的毒株在鸡胚中复制出现最高滴度的时间和引起死亡的时间有差异。以最小感染量接种SPF鸡胚,速发型、中发型毒株引起的死亡时间在60小时或更短些,缓发型毒株则需100小时以上。在鸡胚中出现高滴度病毒的时间,速发型少于24小时,缓发型多于48小时。
细胞培养物:NDV可在许多细胞内复制,现常用鸡胚成纤维细胞作为病毒蚀斑形成单位测定,蚀斑在细胞接毒后2-6天内形成,一般在96小时进行观察。病毒经高度稀释后在细胞内可长出单个蚀斑,将单个蚀斑连续传代后可建立克隆的纯系病毒。 1.NDV除家禽外,在50个鸟目中已证实在27个目中至少有236种鸟也可以实验感染。本病在流行病学上的新特点是自然发病的食种增多,原本病自然发病主要发生于鸡和火鸡,近年来国内已有鹌鹑、鸽及观赏鸟发病的报道。并已从鸭、鹅中分离出弱毒株,从鸡场捕捉的麻雀体中分离出新城疫病毒并检出抗体。
2.在免疫鸡群中仍可发生新城疫,多在二免以前的日龄发病。雏鸡的成年鸡的发病率和死亡率均不高。发病率高者可达75%,一般为3-15%,低者1.5%,病死率高者可达80%,低者为15%左右。
3.传播途径:NDV不能经卵发生垂直传播,病母鸡所产的蛋,在孵化的头4-5天,胚胎会因感染而死亡。NDV在鸡群内的主要传播方式是呼吸道通过气溶胶而发生,病鸡经呼吸道和消化道可向外大量排出病毒。大约在感染后2天和出现临床症状前1天,病鸡就从呼吸道将病毒排到空气中,病愈鸡在症状消失后1周停止排毒,个别鸡的排毒可达1个月以上。鸡群间的传播方式则是通过鸡群的转移及饲料、饮水、饲料袋和人员车辆往来等而发生的。 1、临床症状特点:在中国根据临床发病的特点,可将鸡新城疫分为典型和非典型两种。

典型鸡新城疫:(主要包括速发嗜内脏型、速发嗜神经型两种),患病雏鸡(育成鸡)主要表现为明显的呼吸道症状。病鸡张口伸颈,咳嗽,气喘,呼吸困难,有“呼噜”声响,口中有粘液,有摇头和吞咽动作,企图将粘液吐出,排出绿色而有时带血的粪便,紧着表现有歪头,扭颈或站立不稳等神经症状。此种类型多发生于非免疫鸡群,及免疫失败的鸡群。病鸡一般在2-8天内死亡,幼鸡的死亡率可达90%以上。成年鸡发生此种类型主要表现为产蛋急剧下降或有腹泻症状,产蛋下降30-70%不等,死亡率10-50%不等。
非典型鸡新城疫(包括中发型、缓发型、无症状肠型等):幼龄鸡可发生死亡,成年鸡可出现呼吸系统症,食欲下降,常并发大肠杆菌和霉形体感染。该类型主要发生于免疫水平偏低或免疫力不整齐的鸡群,成年鸡群可出现产蛋下降,经常发生零星死亡并持续较长时间。死亡率在1-5%之间。此种类型常与鸡传染性支气管炎,鸡霉形体病相混淆,常用血清学方法证明其感染。
2、病理变化:典型新城疫的主要病变在消化道,腺胃肿胀并有乳头出血,小肠有暗红色出血性病灶,盲肠扁桃体肿大,出血溃疡,病程较长者可见肠壁上外观形成“枣核状”溃疡,产蛋鸡卵黄破裂等。一般将腺胃出血,盲肠扁桃体肿大溃疡作为新城疫的特征性病变,据此作为诊断依据。非典型新城疫:雏鸡常见心冠脂肪出血,腺胃肿胀,小肠卡他性炎,盲肠扁桃体、泄殖腔出血,气管内粘液增多,气囊混浊并有干酪样物等。成年鸡常不见任何病变。 1、病料采集:有临床症状的鸡,可自气管与泄殖腔棉拭取样用于病毒分离。死亡鸡肺、脑、脾、肝、肾和骨髓都可用于病毒分离。其中脑组织含毒时间较长,且不易被其它细菌污染,是较好的送检病料。
2、病毒分离:病料加双抗(每毫升加青霉素1000单位,链霉素100微克)处理后经绒毛尿囊腔接种9-11日龄鸡胚。强毒株和中等毒力毒株,常使鸡胚在36-96小时死亡,弱毒株有时也可使鸡胚死亡。也可用病料接种鸡胚成纤维细胞进行病毒分离。将收集的尿囊液或细胞液作红细胞凝集试验(HA),出现凝集现象,再用已知的抗新城疫血清与尿囊液或细胞液作血凝抑制试验(HI),凝集作用能被抗新城疫血清抑制,方能证实是新城疫病毒。
3.病毒毒力鉴定:常用的鉴别NDV毒力的方法有鸡胚平均致死时间试验(MDT)、鸡脑内致病指数试验(ICPI)、鸡静脉致病指数试验(IVPI)及空斑形成试验等,目前关于NDV毒力的检测新方法层出不穷。Hodder等(1994)、王树双等(1994)、古长庆等(2000)用抗F0蛋白的裂解位点的抗血清对NDV进行了毒力鉴定方面的研究,证明可以有效区分强弱毒株。Russel等(1983),Alexander等(1997)应用针对表面糖蛋白的单克隆抗体来进行毒株的鉴定和分型。国外,Marin等(1996)、Ballagi(1996)、Angela(1998)等对PCR技术运用于NDV毒力检测的可行性进行了研究。
(1)对鸡胚平均致死时间(MDT):用灭菌生理盐水10倍递进稀释病毒,每一稀释度取0.1毫升,分别接种9-10日龄SPF鸡胚5枚。接种鸡胚于37℃孵育7天,每天上午、下午各检查一次。记录第一个鸡胚死亡时间,使所有鸡胚死亡的最高稀释倍数为病毒的最小致死剂量。MDT是最小致死剂量致鸡胚死亡的平均时间。
(2)对1日龄鸡脑内致病指数(ICPI):取10只1日龄SPF鸡,每只脑内接种0.05毫升用灭菌盐水1:10倍稀释的无菌尿囊液,每天观察鸡群一次,连续8天,正常者记为0分,发病者记为1分,死亡者记为2分。每次观察每只鸡的平均记分值即为ICPI。
(3)对6周龄鸡静脉致病指数(IVPI):取10只6周龄SPF鸡,每只静脉内接种0.1毫升灭菌生理盐水稀释的无菌尿囊液,连续观察10天,正常者记为0分,精神沉郁者记为1分,瘫焕者记为2分,死亡者记为3分。每次观察每只鸡平均记分值即为IVPI。
Allan等,按照以上三方面的测定结果,可将NDV分为缓发型、中发型、速发型三类。
4、血清学诊断方法:
取6-9日龄SPF鸡,腿部肌注0.1毫升滴鼻作为首免,2周后用油佐剂灭活苗0.5毫升肌注,第5周采血分离血清,,可制成多克隆抗血清用于病毒鉴定和ND诊断。
HA和HI:抗原作2n稀释,现多在96孔V型板上进行(HA)。未知病料有血凝特性,能被已知血清抑制,可作出诊断。2n稀释的血清进行HI,可测出血清中的HI滴度,在感染鸡群中HI滴度一般不均匀,有报道有的鸡群,低者为零,高者为1:1024。在免疫鸡群中,HI滴度较整齐一般达1:32?/FONT>1:64。目前HA和HI因操作简便,不需特殊仪器设备等优点,被广泛作为鸡场进行ND诊断及免疫鉴测的常规方法。
除HA和HI外,血清中和试验(SNT)、免疫双向扩散(IDD)、神经氨酶酶抑制试验(NIT),酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫试验(RIA)等均有用于ND诊断的报道。Adair等(1989)认为检测NDV抗体的ELISA重复性好,特异性和敏感性高,与HI呈明显相关性,能区别保护性抗体。目前已有较多报道采用单克隆抗体技术来鉴别NDV毒株。目前这多种方法还未在生产实际中作为常规监测本病的手段。 1、疫苗种类及其选择:中国生产的鸡新城疫疫苗有两大类,一为弱毒活苗,另一为灭活疫苗。弱毒苗的毒力由弱到强依次是Ⅲ系(F系),Ⅱ系,Ⅳ系及一些克隆化毒株(如克隆-30,克隆-83,克隆-79等),Ⅰ系。在弱毒苗的选择上,F系毒力虽弱但免疫原性较差,目前未应用,Ⅱ系毒力弱,安全性好,首推用于首免,Ⅳ系及一些克隆化毒株,毒力较Ⅱ系稍强,免疫原性及安全性均好,目前已被广大鸡场特别是大型鸡场在各种日龄鸡中广泛采用。I系苗在弱毒疫苗中毒力最强,一般用于2月龄以上鸡的免疫,在大型鸡场应慎用,以防止散毒及毒力返强引起非典型ND发生,应主要用于农村散养鸡和小型鸡场,近年来也有将I系苗用于1日龄,20-25日龄鸡群免疫的报道,取得较好免疫效果,但在使用方法及用是上应严格控制。目前ND灭能疫苗主要由弱毒经甲醛灭活后加入油佐剂制成,ND油佐剂灭活疫苗的安全性好,免疫力强,所产生的HI滴度比弱毒苗高,可用于弱毒苗免疫后加强免疫,在本病污染严重的鸡场用灭活疫苗与弱毒苗联合免疫,有较好的免疫效果。目前ND弱毒苗及灭活苗也有与其它病毒共同制成的联苗(如:ND-IB、ND-EDS、ND-EDS、ND-IB-IBD等二联或三联苗),但以单苗效果更好,在流行地区及本病污染严重的鸡场特别在早期免疫时,最好用单苗。
2、免疫程序:ND的免疫程序也应根据饲养管理情况,流行病学情况,环境因素,鸡群免疫状态,疫病流行情况进行设计。不同地区,不同鸡场免疫程序不能一概而论。
首免时间:雏鸡可经蛋黄传递从母体获得的被动免疫抗体椖冈纯固澹?酌馐奔涞娜范ㄖ饕?悸悄冈纯固宓挠跋臁R话阊芯咳衔???Τ隹呛竽冈纯固逯鹑丈?撸?/FONT>5-7日达到高峰,9日龄后逐渐下降,28日龄完全消失,母源抗体的半衰期为4-5天(平均4.5天),为推算最恰当的首免日龄,通常在出壳第一天采血检查HI滴度,大批雏鸡的每批抽样不少于0.1%。得出1日龄雏鸡母源抗体平均值后换算为对数值,再按公式计算:
雏鸡最适首免日龄=4.5×(1日龄HI的对数值-4)+5
如:一批鸡的1日龄平均HI效价为1:32,即log25,按公式计算,这批鸡的最适首免日龄为:4.5×(5-4)+5=9.5天。
各地报道及使用的免疫程序尚难统一,笔者认为:对农村专业户和小型鸡场,可在7日龄用Ⅱ系滴鼻首免,21-25日龄用Ⅳ系苗重复一次,60-70日龄用Ⅰ系苗加强免疫接种一次。大型鸡场蛋鸡可在10天左右进行首免(Ⅱ系滴鼻),21天二免(Ⅳ系饮水、气雾),35-40天三免(Ⅳ系饮水,气雾),60-70天四免(Ⅳ系饮水,气雾),110-120天(油苗)。商品蛋鸡在整个产蛋周期不再免疫。种鸡在产蛋高峰过后280-300天再补免一次,以保证种蛋的母源抗体水平。若在二、三、四免用油苗加活苗同时免疫,可在三次中省去。商品肉鸡一般只免前2-3次,只用弱毒苗。
3、免疫效果监测:每次免疫后10天,抽查1/1000鸡进行测定,HI滴度增加两个以上,如免疫前1:8,免疫后1:32。则为合格,若免疫后抗体滴度很低,仅有1:4?/FONT>1:8,则应进行重免。

4、免疫失败原因:(1)疫苗的问题:所用弱毒活疫苗的HA效价应≥1:640。油乳剂灭活苗不能有严重的油水分层现象。应正确选择疫苗种类及剂量,盲目加大剂量也可能发生免疫后发病。
(2)首免日龄不当:免疫时间过早,疫苗受母源抗体干扰,免疫过晚,母源抗体已降低,不能有效保护,雏鸡可能在疫苗产生有效免疫前感染,两种情况均可造成免疫失败。
(3)免疫方法不当:首免不能用气雾免疫,以免引起霉形体感染等应激综合症。若进行饮水免疫,应严格控制水质,避免漂白粉及金属离子对疫苗的破坏,可用井水或自来水烧开冷后再用。在水中加入1%鲜奶或脱脂奶粉,对疫苗病毒粒子有一定保护作用。饮水前先断水,夏天断水4小时,冬天断水6小时,饮水器数量足够,保证每只鸡都能饮到足够的水量,疫苗能在30分钟内全部饮用完为好。
(4)鸡群健康状况:目前已证实,鸡传染性法氏囊病,鸡传染性贫血因子病,早期鸡白痢严重感染等均可影响鸡的免疫功能。据报道,患IBD的一日龄雏鸡,对ND的免疫抑制率可达40%,7日龄为32.5%。另外目前广泛采用的IBD弱毒苗在免疫后均对法氏囊产生短期可恢复的破坏作用,在免疫程序的安排上,还应将ND疫苗的免疫始终安排在用IBD弱毒苗之前几天。
5、发病后的措施:
(1)综合措施:发病后对场地、用具、物品等进行严格彻底清洁消毒,选用过氧乙酸,百毒杀等,死鸡深埋。可根据情况进行紧急接种,成年产蛋鸡发生非典型新城疫后,一般不进行紧急接种也能耐过,但雏鸡或育成鸡发生新城疫应采取紧急预防注射的方法,常可收到终止疫情的作用。雏鸡可用Ⅳ系苗(或克隆30或Ⅱ系,滴鼻或点眼),中雏以上可肌注两倍量I系苗(但大型鸡场应慎用I系)也可用油乳剂单苗肌注。紧急接种会加速一部分已感染鸡的死亡,紧急接种后鸡群可在7-10天内停止死亡。紧急接种保护力的高低,还取决于入侵野毒株的毒力,,鸡群原有抵抗力,以及饲养管理条件等因素。
(2)治疗:无特效药,有条件可用异源血清(牛、羊高免血清)1ml/kg体重进行皮下或肌注。也有用高免蛋黄液,1-2ml/只,皮下或肌注。在一定程度上可有效控制疫情。在使用高免蛋黄液时,若供蛋鸡群为非SPF鸡群则应慎用,特别是种鸡和蛋鸡,有可能传入白痢、霉形体、EDS等病原而导致生产力不佳。若为商品肉鸡则可使用高免蛋黄而问题不大。

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