如题所述
第1个回答 2023-01-17
高效去内毒素亲和填料FF
一、 简介
内毒素在生物样品中用常规的方法很难去除,而且有的时候它还会和生物制品结合,这样去除就变得非常复杂,尤其是用原核表达的产品,内毒素含量有时候高达上万EU/mg,这样更增加去除的困难。
国际公认最好的方法就是把某些物质偶联到琼脂糖凝胶上做成特异吸附内毒素的亲和填料,这样它可以特异吸附内毒素,而样品本身不损失,我们就是把这类物质偶联到高度交联的琼脂糖凝胶上制备高效去内毒素亲和填料 FF.
本公司将USP 级别的内毒素的类似底物偶联到药品级的高度交联的琼脂糖凝胶上,可以特异去除病毒,核酸和蛋白等样品中的内毒素。由于采用新的偶联的方法,这种填料刚性更好,特异性更强,载量更高,稳定性好,样品回收率更高。它能耐受37度高温,5天性能不会降低。
本产品一般直接加入到样品中以去除其中的内毒素,而不必装柱,使用方便,非常有效,而且很容易放大。此外在使用过程中配基不脱落,安全可靠,可以重复使用。 填料特性: 特点 基质 配基 配基密度 吸附载量
亲和填料的颗粒大小 最大流速 使用温度
特异性强,无脱落,样品回收率高 琼脂糖凝胶 内毒素的类似底物 4mg /ml
10000-14000Eu/ml 平均50μm 300cm/h 常温
pH 范围,在位清洗时pH 范围可到2-11 保存温度℃ 保存液体乙醇
二、 应用范围
去除各种溶液样品中的内毒素。
三、 应用实例
实验名称:去除内毒素
实验步骤:
1. 将高效去内毒素亲和填料FF 在滤器(G3砂心漏斗也可以)中先用1-2倍填料体
1
积的Buffer 1抽洗,再用3-5倍凝胶体积的Buffer 1将凝胶充分混匀,保持10min ,用50-100倍凝胶体积的注射水分10-20次抽洗。
2. 根据样品溶液中内毒素的含量加入一定量经上述处理的高效去内毒素亲和填料FF
(通常比例为一份样品用1/2或1/3的填料),于三角瓶中4℃、150rpm 振荡48h 。 3. 将以上样品无菌过滤,测内毒素含量。
缓冲液1组成:1%脱氧胆酸钠,20 mM磷酸盐缓冲液,pH7.0。配制:称取Na 2HPO 4.12H 2O
2.43g ,NaH 2PO 4.2H 2O 0.25g,NaCl 4.5g,脱氧胆酸钠5.0g ,加注射用水溶解并定容到500ml
注:上述各步操作中用到的玻璃仪器、滤器均要250℃干烤2h ;0.2µm滤膜要用0.1M NaOH 浸泡过夜后121℃高压灭菌30min 。
如果觉得上面的方法处理很麻烦,而且时间长,可以把填料装填到色谱柱中,然后用0.1M NaOH平衡5个床体积,然后用注射用水洗30个床体积,然后上样,把流穿的样品接到上样的容器中循环去除内毒素,流速控制在2ml/min,这样5-8个小时可去除内毒素。不过这样的方法不如把填料和样品混合震荡的方法,原因在于有时候内毒素和样品结合,需要较长时间去除。脱氧胆酸钠溶液低温容易成胨状,使用时温度可以到30度,避免流不动堵柱子或漏斗。 结果:
浓度(mg/ml) 内毒素 (Eu/mg)
四、 亲和填料应用的注意事项:
1、 该亲和填料每次使用前都需用Buffer 1处理,包括第一次使用时。 2、 配制缓冲液要用无内毒素的注射级用水,配制过程要防止引入内毒素。 3、 适当延长填料与样品溶液的处理时间可以加大内毒素的吸附量。 4、 如果用磁力搅拌要注意转速别太快,避免搅碎填料。
5、 样品如果本身是带负性电荷,为增加样品回收率,样品中可以加
7、 样品内毒素太高,超过填料处理量,需要稀释样品找到内毒素的范围,和经去除后内毒
素的范围对照,就可以知道效果,如果一次去除不完全,可以重复,直到合格为止。 8、 该亲和填料保存条件为20%乙醇,+4~8℃。
2
处理前的样品 处理后的样品
2.90 2.90 5000-7000
本产品有严格的生产质量控制标准,我们力求为您提供最满意的产品、最完备的技术支持和服务,欢迎业内朋友交流合作。
除了为您提供各种包装规格的高效去内毒素亲和填料 FF外,我们还提供它各种填料、柱子和其他服务,包括:
1、填料和柱子选择以及预实验
2、开发各种生物大分子的分离纯化工艺,为您解决分离纯化的难题 3、帮助您合成特殊要求的色谱填料,包括偶联各种配基
4、按客户要求提供各种填料及规格的预装柱,并配相应接口用于各种纯化设备。 5、代理各种进口填料,为客户提供最专业的售前和售后服务。
产品目录: 货号 CS-L02-0A CS-L02-0B CS-L02-00 CS-L02-01 CS-L02-02 CS-L02-03 CS-L02-04
载量 EU/ml 10000-14000高效去内毒素亲和填料预装柱
高效去内毒素亲和填料预装柱10000-14000
高效去内毒素亲和填料FF
高效去内毒素亲和填料FF
高效去内毒素亲和填料FF
500 ml 10000-14000高效去内毒素亲和填料FF
10000-14000高效去内毒素亲和填料FF 大包装
产品名称
包装
特性 粒径耐压最大流速
(cm/h) 及应用 (μm) MPa
去除内毒素
去除内毒素
去除内毒素
去除内毒素
去除内毒素
去除内毒素
去除内毒素
北京韦氏博慧色谱科技有限公司
电话:010-67804548 [1**********]:联系人:韦新桂 E-mail: weixingui@263.net公司网站: 传真:010-67804548。
定货请参考光盘中的定货须知。购买本公司产品可获得一张内容非常丰富的纯化光盘,包括表达,提取,分离,酶切等操作指南以及各公司纯化产品的说明书及手册,是生物大分子分离纯化难得的学习材料。
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一、 简介
内毒素在生物样品中用常规的方法很难去除,而且有的时候它还会和生物制品结合,这样去除就变得非常复杂,尤其是用原核表达的产品,内毒素含量有时候高达上万EU/mg,这样更增加去除的困难。
国际公认最好的方法就是把某些物质偶联到琼脂糖凝胶上做成特异吸附内毒素的亲和填料,这样它可以特异吸附内毒素,而样品本身不损失,我们就是把这类物质偶联到高度交联的琼脂糖凝胶上制备高效去内毒素亲和填料 FF.
本公司将USP 级别的内毒素的类似底物偶联到药品级的高度交联的琼脂糖凝胶上,可以特异去除病毒,核酸和蛋白等样品中的内毒素。由于采用新的偶联的方法,这种填料刚性更好,特异性更强,载量更高,稳定性好,样品回收率更高。它能耐受37度高温,5天性能不会降低。
本产品一般直接加入到样品中以去除其中的内毒素,而不必装柱,使用方便,非常有效,而且很容易放大。此外在使用过程中配基不脱落,安全可靠,可以重复使用。 填料特性: 特点 基质 配基 配基密度 吸附载量
亲和填料的颗粒大小 最大流速 使用温度
特异性强,无脱落,样品回收率高 琼脂糖凝胶 内毒素的类似底物 4mg /ml
10000-14000Eu/ml 平均50μm 300cm/h 常温
pH 范围,在位清洗时pH 范围可到2-11 保存温度℃ 保存液体乙醇
二、 应用范围
去除各种溶液样品中的内毒素。
三、 应用实例
实验名称:去除内毒素
实验步骤:
1. 将高效去内毒素亲和填料FF 在滤器(G3砂心漏斗也可以)中先用1-2倍填料体
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积的Buffer 1抽洗,再用3-5倍凝胶体积的Buffer 1将凝胶充分混匀,保持10min ,用50-100倍凝胶体积的注射水分10-20次抽洗。
2. 根据样品溶液中内毒素的含量加入一定量经上述处理的高效去内毒素亲和填料FF
(通常比例为一份样品用1/2或1/3的填料),于三角瓶中4℃、150rpm 振荡48h 。 3. 将以上样品无菌过滤,测内毒素含量。
缓冲液1组成:1%脱氧胆酸钠,20 mM磷酸盐缓冲液,pH7.0。配制:称取Na 2HPO 4.12H 2O
2.43g ,NaH 2PO 4.2H 2O 0.25g,NaCl 4.5g,脱氧胆酸钠5.0g ,加注射用水溶解并定容到500ml
注:上述各步操作中用到的玻璃仪器、滤器均要250℃干烤2h ;0.2µm滤膜要用0.1M NaOH 浸泡过夜后121℃高压灭菌30min 。
如果觉得上面的方法处理很麻烦,而且时间长,可以把填料装填到色谱柱中,然后用0.1M NaOH平衡5个床体积,然后用注射用水洗30个床体积,然后上样,把流穿的样品接到上样的容器中循环去除内毒素,流速控制在2ml/min,这样5-8个小时可去除内毒素。不过这样的方法不如把填料和样品混合震荡的方法,原因在于有时候内毒素和样品结合,需要较长时间去除。脱氧胆酸钠溶液低温容易成胨状,使用时温度可以到30度,避免流不动堵柱子或漏斗。 结果:
浓度(mg/ml) 内毒素 (Eu/mg)
四、 亲和填料应用的注意事项:
1、 该亲和填料每次使用前都需用Buffer 1处理,包括第一次使用时。 2、 配制缓冲液要用无内毒素的注射级用水,配制过程要防止引入内毒素。 3、 适当延长填料与样品溶液的处理时间可以加大内毒素的吸附量。 4、 如果用磁力搅拌要注意转速别太快,避免搅碎填料。
5、 样品如果本身是带负性电荷,为增加样品回收率,样品中可以加
7、 样品内毒素太高,超过填料处理量,需要稀释样品找到内毒素的范围,和经去除后内毒
素的范围对照,就可以知道效果,如果一次去除不完全,可以重复,直到合格为止。 8、 该亲和填料保存条件为20%乙醇,+4~8℃。
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处理前的样品 处理后的样品
2.90 2.90 5000-7000
本产品有严格的生产质量控制标准,我们力求为您提供最满意的产品、最完备的技术支持和服务,欢迎业内朋友交流合作。
除了为您提供各种包装规格的高效去内毒素亲和填料 FF外,我们还提供它各种填料、柱子和其他服务,包括:
1、填料和柱子选择以及预实验
2、开发各种生物大分子的分离纯化工艺,为您解决分离纯化的难题 3、帮助您合成特殊要求的色谱填料,包括偶联各种配基
4、按客户要求提供各种填料及规格的预装柱,并配相应接口用于各种纯化设备。 5、代理各种进口填料,为客户提供最专业的售前和售后服务。
产品目录: 货号 CS-L02-0A CS-L02-0B CS-L02-00 CS-L02-01 CS-L02-02 CS-L02-03 CS-L02-04
载量 EU/ml 10000-14000高效去内毒素亲和填料预装柱
高效去内毒素亲和填料预装柱10000-14000
高效去内毒素亲和填料FF
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500 ml 10000-14000高效去内毒素亲和填料FF
10000-14000高效去内毒素亲和填料FF 大包装
产品名称
包装
特性 粒径耐压最大流速
(cm/h) 及应用 (μm) MPa
去除内毒素
去除内毒素
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北京韦氏博慧色谱科技有限公司
电话:010-67804548 [1**********]:联系人:韦新桂 E-mail: weixingui@263.net公司网站: 传真:010-67804548。
定货请参考光盘中的定货须知。购买本公司产品可获得一张内容非常丰富的纯化光盘,包括表达,提取,分离,酶切等操作指南以及各公司纯化产品的说明书及手册,是生物大分子分离纯化难得的学习材料。
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