自己设计的基因导入到载体后，扩增完成，用PCR检测和双酶切检测成功，但是测序后基因配对率不高，求指教

PCR检测和酶切检测成功的话，说明你确实插入东西了，你确定你这两种检测用的引物和酶都没问题吗？测序结果你是用正向引物测序的还是用的反向引物测序的，如果是反向引物的话，测序结果需要reverse complement以后再跟原始序列进行比较

你再比下测序结果的互补序列、反向序列、反向互补序列看看，是否是忘了这么比较了

如果再不是的话那就说明你的这段序列不是保守序列追问

这段序列不是保守序列是什么意思啊？怎样检测？怎样修改呢？

这段序列不是保守序列是什么意思啊？怎样检测？怎样修改呢？

追答

互补序列、反向序列、反向互补序列都比过了吗？

不是保守序列的意思就是不同的个体他们的那段序列可能有差异

追问

这样啊，谢谢指点！

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