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原核基因表达的基本元件
求
原核表达
详细步骤
答:
基本
步骤:目的
基因的
扩增、载体与目的基因双酶切、电泳、割胶回收、目的基因与载体的连接反应、重组体筛选、验证重组体、转化入大肠杆菌进行
表达
。问题在于:目的基因如何获取,扩增策略的决定,表达载体的选择,双酶切选择哪一对限制性内切酶,如何筛选重组体等等。
基因工程问题,真
核基因
在
原核
细胞中如何
表达
答:
二、为了确保真
核基因
在
原核
细胞中有效
表达
,选择的表达载体应含有宿主菌能够识别并使用的原核启动子。市售的表达载体通常已经包含这类启动子,适用于大多数
原核
生物。三、若真核基因与宿主原核细胞的密码子使用偏好差异较大,可能需要对基因序列进行密码子优化,以适应宿主细胞的密码子使用习惯,从而提高...
真核生物的
基因
在
原核
生物中
表达
,大致采用什么路线?
答:
同意楼上的意见,不过,在
原核
生物中
表达
真
核基因
可以利用包含体的方法,直接将真核生物的基因克隆出来,通过载体或者是质粒转移到原核细胞中去,通过DNA翻译表达出来的蛋白质因为没有正确的空间折叠,所以不具备生物活性,只能分泌到细胞质中,形成包含体,工业上将细胞破碎后收集包含体,通过一系列方法使...
急用!一论述题:如何克隆一个功能性
基因
,如何在
原核
系统中高效
表达
?
答:
2、原核生物的表达是以操纵子为单位的。操纵子是数个相关的结构基因及其调控区的结合,是一个
基因表达的
协同单位。调控区主要分为三个部分:操纵基因、启动子及其他有调控功能的部位。3、功能性基因一般是真核生物所具有的基因,而真核生物
基因基本
具有外显子和内含子等结构。
原核基因
一般不含有内含子...
以乳糖操纵子为例简述
原核
细胞
基因表达
调控原理。
答:
【答案】:乳糖操纵子的结构:含有一个操纵序列(O)、一个启动序列(P)、在P序列上游有CAP结合位点、三个编码乳糖代谢酶的结构
基因
(Z、Y、A)和一个调节基因(I)。O、P、CAP结合位点共同构成乳糖操纵子的调控区,三个结构基因构成乳糖操纵子的信息区。I基因转录、翻译生成阻遏蛋白。乳糖操纵子的调节...
原核
生物和真核生物转录调控的不同
答:
1、起始因子的不同:原核生物:σ因子决定RNA聚合酶识别特异性;真核生物:真核基因顺式作用
元件
影响基因转录活性。2、模型不同:原核生物:操纵子模型在
原核基因表达
调控中具有普遍性;真核生物:反式作用因子是真核细胞中重要的转录调控因子;3、转录调控的调节方式不同:原核生物:原核操纵子受到阻遏...
基因载体与
基因表达
载体的区别?
答:
一、构成不同
基因表达
载体:构成包括启动子、终止子、标记基因、目的基因。重组质粒:构成包括目的基因片段、质粒、酶。二、对象不同 基因表达载体:基因表达载体的对象通常是活细胞。重组质粒:重组质粒的对象通常是细菌。三、原理不同 基因表达载体:将不同来源的基因在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞...
原核
生物
基因表达
调控主要发生在哪一水平
答:
原核
生物
基因表达
调控主要发生转录水平。基因调控是现代分子生物学研究的中心课题之一。因为要了解动植物生长发育规律。形态结构特征及生物学功能,就必须搞清楚基因表达调控的时间和空间概念,掌握了基因调控机制,就等于掌握了一把揭示生物学奥秘的钥匙。基因表达调控主要表现在以下几个方面:①转录水平上的...
原核
细胞的
基因表达
具有什么特点
答:
由于
原核
生物大都为单细胞生物,缺乏核膜,因此极易 受外界环境的影响,需要不断地调控
基因的表达
,以适应 外界环境的营养条件和克服不利因素,提高生物的应变与 适应能力以完成生长发育与繁殖的过程。这种调控大多以 操纵子为单位进行。
原核表达
外源
基因的
应用
答:
1、
基础
研究:通过
原核表达
系统,科学家可以方便地大量制备纯化的外源基因编码的蛋白质,用于基础研究和药物研发。例如,研究蛋白质的结构和功能,或者探究
基因表达
调控的机制。2、药物研发:许多疾病的治疗药物,如胰岛素、干扰素等,都是通过原核表达系统生产的。原核表达系统可以快速、高效地大量制备蛋白质...
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