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原核表达信号肽没去掉影响
原核表达信号肽没去掉影响
答:
因此,如果信号肽没有被去除,
蛋白质就会被停留在原核细胞质中,而不会被正确的转运到目标位置,从而影响表达
。可以使用天然的信号肽剪切酶或进行胰蛋白消化等方法去除蛋白质的信号肽序列。此外,也可以通过改变蛋白质的编码序列来去除信号肽。
原核
生物大肠杆菌异源
表达
一定要切除
信号肽
吗?
答:
一般要进行切除
。假如你将那个来自原核的酶(包括信号肽序列)插入表达载体后,表达产物的信号肽也很难将酶分泌出来,这里涉及到的问题很多,首先能否可溶性表达,其次信号肽能否在宿主菌中能起作用(不同种类的细菌,信号肽有差异),信号肽能否被信号肽酶切除,很多情况下信号肽即使能起作用,一般也只能...
PET-22B
原核表达
载体的
信号肽
可以被切除吗?
答:
这个标签很小的,一般不需要切去,对实验没什么
影响
。但一定要切去的话,可以用凝血酶切除,切除方法参照酶的说明书,切去后在再做一次蛋白纯化。祝 好运~
原核表达
为什么
去除信号肽
?
答:
细胞没有核膜,缺少细胞器 通常做细胞内
表达
不需要
信号肽
的定位作用 多余的信号肽不能被细胞识别切除 有可能
影响
蛋白质的正确折叠 从而产生一系列问题
在做
原核表达
的时候带信号肽表达时没有表达,
去掉信号肽
后就表达了,这...
答:
原核表达
是边转录边表达的,没有区域间隔。
信号肽
大多是疏水性的,溶解性较差,所以在原核中的表达会有些困难。另外原核生物本身的基因中是不存在什么信号肽片段的,信号肽序列中的密码子对原核生物来说可能是稀有密码子。
原核表达
带有分泌
信号肽
的蛋白,是细胞内多还是细胞外多
答:
关键是这个
信号肽原核
细胞买不买单。一般认为,还是
原核
细胞胞内
表达
居多。如果有原核细胞毒性,表达量可能不高。
为什么要用大肠杆菌进行p450异源
表达
答:
一般要进行切除
。 假如你将那个来自原核的酶(包括信号肽序列)插入表达载体后,表达产物的信号肽也很难将酶分泌出来,这里涉及到的问题很多,首先能否可溶性表达,其次信号肽能否在宿主菌中能起作用(不同种类的细菌,信号肽有差异)
信号肽
、导肽、转运肽分别是什么?
答:
1、
信号肽
是引导新合成的蛋白质向分泌通路转移的短(长度5-30个氨基酸)肽链,作用是负责把蛋白质引导到细胞含不同膜结构的亚细胞器内。2、导肽(leadingpeptide)又称导向序列(targetingsequence),是游离核糖体上合成的蛋白质的N-端信号,其作用是运送蛋白质。3、转运肽(transitpeptide),是一种12~60...
做蛋白在真核细胞的
表达
,但是表达量很低,怎么解决
答:
那么使用
原核表达
系统就很合适了。有的时候在不同的表达体系里面对蛋白的表达量是有
影响
的。当构建完成后携带有信号肽的时候,一些蛋白在真核表达体系中表达量极低。
去除信号肽
序列值后,直接表达成熟肽,表达水平明显提高。所以说构建的真核表达载体高表达mRNA却检测不到目的蛋白是完全有可能的。
为什么有些在
原核
细胞中
表达
的真核蛋白没有生物活性
答:
原核
生物没有真核加工目的蛋白的酶(切去内含肽,
信号肽
)或分子伴侣,及修饰(如糖基化)等,蛋白质必须有正确构象才有活性,原核生物只是
表达
出前体。
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