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原核表达煮菌时间
关于
原核表达
问题
答:
菌
浓度OD=0.6-1.0开始诱导,你可以在2h,4h,8h的时候取个样,跑一个PAGE胶考马斯染色看看总的目的蛋白浓度,每个蛋白
表达
速度不同,需要的
时间
不一样,一般4h就可以了,最好还要做一次超声破碎或者酶解,离心分离以后沉淀和上清分别
煮
样,看你的蛋白在上清和沉淀当中的分布,最好是在上清,如果没...
原核表达
大摇摇
菌时间
答:
12到16小时
。原核表达大摇摇菌的时间要求一般不是很严格,通常12-16小时,摇菌还分为大摇和小摇,大摇时间为16个小时,小摇时间为12个小时。
原核表达菌
之前可以表达蛋白,为什么放一段
时间
不表达蛋白了
答:
应该是
原核表达
宿主
菌
比较准确 原核表达宿主菌之前可以表达蛋白,放一段
时间
不表达蛋白原因很多 首先要确认其他条件是否也有改变,比如其他基因,质粒载体,表达条件等等 原核表达宿主菌保存条件没有控制好可能导致宿主菌退化,被污染等等,结果就造成蛋白表达变少或者不表达。
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