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原核表达16度诱导多久合适
原核表达16度诱导多久合适
答:
12到48小时
。原核表达系统是表达外源基因的一种方法,在16摄氏度下进行诱导的时间控制在12到48小时范围内,可以使得蛋白缓慢合成,有利于蛋白的正确折叠,从而形成可溶性蛋白。
原核表达
在
16度
应
诱导多长时间
答:
低温诱导一般需要的时间都比较长,
一般如果能够诱导出来的话大概是24小时
。如果是PET系统的话,有些蛋白是16度诱导不出来的,你得自己重新摸一下诱导的温度。
质粒,一般转染
多久
可以提蛋白
答:
真核细胞转染么?一般转染48h后目的蛋白
表达
量达到峰值~单根据具体细胞而定~
原核
细胞体外表达一般是
16度
过夜
诱导
~
IPTG
诱导
BL(DE3)/BL(DE3)plysS蛋白
表达
的最佳温度,时间,IPTG的浓度...
答:
诱导温度的话一般20-30℃的都有
,我同学有次用16℃诱导出来的。
基因
原核表达
的详细过程
答:
构建人resistin基因
原核表达
载体并观察其表达,为开展对resistin的研究打下实验基础。【方法】 酚氯仿一步法从一位2型糖尿病合并胆管癌患者腹壁皮下脂肪组织抽取总RNA,RT-PCR法扩增出resistin基因cDNA,经测序后,PCR产物亚克隆入T载体,用EcoRI和KpnI分别酶切重组T质粒和原核表达载体pGENKS,然后resistin基因片段和表达载体...
原核
系统中影响外源基因
表达
效率的主要因素?
答:
在植物转基因研究中,使用天然的启动子往往不能取得令人满意的结果,尤其是在进行特异表达和
诱导表达
时,表达水平大多不够理想。对现有启动子进行改造,构建复合式启动子将是十分重要的途径。例如,Ni等人将章鱼碱合成酶基因启动子的转录激活区与甘露碱合成酶基因启动子构成了复合启动子,GUS表达结果表示:改造后的启动子活性...
植物基因中的大肠杆菌
原核表达
方法谁知道?生物医学工程方面的信息哪里...
答:
植物中克隆的目的基因被克隆到特异设计的质粒载体上,受噬菌体T7强启动子控制;
表达
由宿主细胞提供的T7 RNA聚合酶
诱导
。当需要表达蛋白时,在细菌培养基中加入IPTG来启动表达。不同载体在邻近克隆位点处具有编码不同的多肽“标签”的序列,在定位、检测或纯化目的蛋白时提供方便。以pET-32a(+)为例,介绍...
关于甲型H1N1流感
答:
2)将猪流感病毒免疫原(HA和NA)基因单独或者与细胞因子(白介素-6、Y干扰素等)编码基因串联后克隆到真
核表达
质粒中,然后再将重组DNA质粒导入机体细胞,通过机体内源性表达并提呈给免疫系统,
诱导
宿主产生特异性免疫应答,发挥保护作用,这就是所谓的DNA疫苗。研究结果表明,单纯依靠猪流感病毒HA基因免疫的DNA疫苗效果并不...
果蝇Or59b嗅觉受体基因调控的热力学模型
答:
在OSN开发过程中,OR被异染色质覆盖,染色质的受限开放
诱导
了一个OR等位基因的
表达
。神经元表面的OR活性引起复杂的反馈回路,从而降低了染色质打开的可能性。这种类似选择的模型可以预测单基因OR表达,但该表达在空间上受到非随机限制。指导选择的过程尚不十分清楚。在较小且数值上不太复杂的果蝇嗅觉系统中,与小鼠中的...
各位高人 我想问一个问题,我将一个目的基因连接到质粒上 我想将这个...
答:
然后在平板上挑选几个单克隆菌落进行扩增培养,质粒(以及其上的重组基因)会随着细菌的扩增而扩增。用扩增好的菌液来抽提质粒就得到比原先多得多的目的基因拷贝数。如果用的是
合适
的菌种,那些菌液还可以用来
诱导表达
相应的蛋白质(假设这是编码
原核
生物蛋白的基因或者是用cDNA整出来的而且能在原核生物...
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