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外源基因导入细胞的方法
将重组
DNA导入细胞
内有哪些
方法
?它们的原理是什么?
答:
【答案】:(1)
将重组质粒导入原核细胞称转化
,
通常用氯化钙法使大肠杆菌细胞处于感受态,从而将外源DNA导入细胞
。另一个常用方法是用脉冲高压电瞬间处理,使外源DNA高效导入细胞,称为电穿孔法。(2)将重组体DNA包装成噬菌体,使外源基因导入宿主细胞称转导,在适宜条件下使转化率提高。(3)将外源基因导入...
如何将
外源基因导入
植物
细胞
并使之表达?
答:
直接法
是将目的基因直接导入受体细胞中,包括磷酸钙-PEG法、电击穿孔法、显微注射法、基因枪法等。
简述
外源基因
转入受体
细胞的
途径
答:
4;
②人工合成(反转录法和化学合成法): 3:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因
;③PCR技术扩增目的基因,方法是从转基因生物中提取蛋白质,位于基因的首端。 2. 基因工程的基本操作程序,并且可以遗传至下一代、将目的基因导入受体细胞(1)转化的概念。(2)常用的转化方法。 ②终止子,位于基因...
将
外源基因导入
原核
细胞
或真核细胞分别有哪些
方法
?
答:
1.1
DNA直接注射法: 是目的基因导入的最简单方法
, 但注入量有限, 能够接触到的肿瘤细胞有限,故获得的肿瘤细胞转化率很低, 多通过肿瘤局部多点注射给药。1.2
颗粒轰击技术
:将目的基因包被金属以后,利用高压发射装置, 加速包裹目的基因的金属颗粒进入细胞,从而提高肿瘤细胞的转化率。2 化学方法 即用化学...
有哪些
方法
可以将
外源基因导入
受体
细胞
答:
植物:农杆菌转化法,
基因
枪法,花粉管通道法。动物:显微注射法。
重组
DNA
分子
导入
受体
细胞的
主要
方法
有哪些
答:
(2)花粉管通道法:在授粉后向子房注射含目的
基因的
DNA溶液,利用植物在开花、受精过程中形成的花粉管通道,将
外源DNA导入
受精卵细胞,并进一步地被整合到受体
细胞的
基因组中,随着受精卵的发育而成为带转基因的新个体。(3)基因枪法:基因枪根据动力系统可分为火药引爆、高压放电和压缩气体驱动三类。其...
脂质体转染原理步骤
答:
外源基因
进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染
细胞的方法
使得其进入...
要将
外源基因
转入到生物体中包括哪些主要步骤
答:
1、获取目的基因 2、形成重组
DNA
分子 3、将重组DNA分子
导入
受体
细胞
4、筛选含有目的
基因的
受体细胞 5、目的基因表达 工具:限制性核酸内切酶(切割磷酸二酯键)、DNA连接酶(链接磷酸二酯键)、载体(主 要为质粒、原核小型环状DNA)获取目的基因:若序列已知则用PCR扩增或化学
方法
合成:若序列...
将
外源基因导入
植物
细胞
中
的方法
有哪些
答:
在基因工程中,将
外源基因导入
植物
细胞的方法
有,农杆菌转化法,基因枪法,花粉管通道法。
简述转化,感染,传导和转染间的区别
答:
(1)转化:含外源基因的重组质粒(载体)将外源基因直接导入原核细胞(如细菌)。(2)感染:在基因转移实验中强调重组病毒载体入侵受体
细胞的
过程。(3)转导:通过重组病毒载体将
外源基因导入
真核细胞或原核细胞。(4)转染:指重组质粒载体或游离核苷酸在脂质体等介导下进入真核细胞。2、用法不同 (...
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