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外源基因的表达
外源基因
在原核细胞中
表达
时蛋白质的存在形式有哪些?
答:
1. 游离蛋白质(Free proteins):外源基因被转录和翻译后,产生的蛋白质可以以游离的形式存在于细胞质中。这些蛋白质可以执行其特定的功能,例如催化化学反应、结合DNA或其他分子等。2. 融合蛋白质(Fusion proteins):有时,在
外源基因表达
时,可以将外源基因与宿主细胞中的其他蛋白质基因进行融合,生成...
简述
外源基因
在pET
表达
载体中实现表达的基本原理。
答:
在pET表达载体中,
外源基因的表达
受T7噬菌体RNA聚合酶的调控,目标基因被克隆到不为大肠杆菌RNA聚合酶识别的T7启动子之下,在加入T7RNA 聚合酶之前几乎没有表达发生。加入IPTG诱导T7RNA 聚合酶的产生,激活T7启动子,启动转录,进而完成表达。
举例说明
外源基因
可以在哪几种宿主细胞中的大规模
表达
,各有什么特点...
答:
(1)
外源基因
在大肠杆菌中
的表达
,特点:①大肠杆菌的结构简单;②生理代谢途径较为清楚;③并且易于遗传操作和大规模发酵培养。因此,大肠杆菌已成为高效表达异源蛋白质最常用的原核表达系统。(2)外源基因在酵母中的表达,特点:①基因组简单,易于分析操作;②具有真核生物特有的蛋自质翻译后修饰加工体系,...
植物如何
表达外源基因
答:
进行亚细胞定位或蛋白互作验证等实验。(一)过
表达
转
基因
植株的创制将目的基因导入植物细胞(特指稳定表达系统)通常可通过农杆菌介导法、花粉管通道法、基因枪法、显微注射法等进行,其中,农杆菌介导法是较常用的遗传转化方法,另外,单子叶植物也可用基因枪法,绿色开花植物可采用花粉管通道法,因为容易...
外源基因
在哺乳动物细胞中
表达
的载体系统可分成几类?简述其主要特点及用...
答:
【答案】:哺乳动物细胞中并不携带相当于细菌质粒的附加体DNA,因此通常应用来自DNA病毒或RNA病毒基因作为载体。目前常用的动物病毒
表达
载体系统大体上可分为以下两类。一类是整合型(integrated),为稳定表达载体系统。即
外源基因
通过这种病毒载体与宿主细胞的染色体整合,外源基因随宿主细胞基因组的复制而扩增...
影响
外源基因
在受体细胞中
表达
的因素主要有哪些
答:
影响外源基因表达的因素:①阅读框架对转化
基因表达
的影响:阅读框架是基因的编码区,包含从启始密码子至终止密码子之间的cDNA序列。
外源基因的
编码区只有与表达载体DNA的起始密码相吻合时,才能正确的转译出蛋白质。用人工接头可以调节阅读框架,选择合适的人工接头,即可将外源基因插入到表达载体的正确阅读框架...
外源基因
在真核细胞中
表达
的意义
答:
实现
外源基因的表达
和调控。外源基因在真核细胞中表达的意义主要是实现外源基因的表达和调控,以获得具有特定性状和功能的蛋白质或核酸等生物大分子。外源基因表达产物包括蛋白质、多肽、酶、激素、抗体、疫苗等,具有广泛的应用价值。例如,将外源基因导入植物细胞,可以获得抗虫、抗病、抗逆等性状;将外源...
如何将
外源基因
导入植物细胞并使之
表达
?
答:
【答案】:
外源基因
导入植物细胞并使之
表达
的方法分为载体法和直接法。Ti质粒是一种细菌质粒,它自然存在于一种革兰氏阴性菌——根瘤土壤杆菌的细胞中。根瘤土壤杆菌可感染大多数双子叶植物的受伤部位,使之产生冠瘿瘤。植物产生的这种根瘤细胞与动物的癌细胞相似,它们能独立地、不受控制地生长。根瘤细胞...
影响
外源基因表达的
基因主要有哪些
答:
影响
外源基因表达的
基因主要有哪些:1. 启动子的强弱:有效的转录起始是外源基因高效表达的关键,因此选择强且可调控的启动子至关重要。2. 核糖体结合位点的有效性:SD序列的存在对原核细胞mRNA翻译起始至关重要。3. SD序列和起始密码子AUG的间距:适当的距离有利于提高翻译效率。4. 密码子组成:避免...
外源基因表达
的检测方法有哪些?
答:
外源基因表达
蛋白的检测 表达蛋白的检测方法有三种:①生化反应检测法:主要通过酶反应来检测;②免疫学检测法:通过目的蛋白(抗原)与其抗体的特异性结合进行检测,具体方法有Western杂交、酶联免疫吸附法(ELISA)及免疫沉淀法;③生物学活性的检测。Western杂交是将聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分离抗原(...
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