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外源基因表达的基本过程
怎么鉴别
外源基因
和内源
基因的表达
答:
2)如果用目的基因蛋白抗体进行免疫印迹实验,得到的蛋白表达水平是否应为
外源基因
和内源
基因表达
之和;3)如果有两个不同的基因都标记上同样的标签(如His), 共转染进细胞后,用His抗体是否可以同时检测两个基因的蛋白表达?回复:我也在用His单抗做western blot,恰恰也遇到这个问题,共同探讨 转染前...
重组菌当中的
外源基因
是否
表达
可以通过几个层面进行分析
答:
外源基因的表达
与检测 9 超声处理5分钟,每30秒间隔50秒,12000rpm离心10分钟,取上清作为蛋白样品。10 渠5ul测定蛋白浓度。11 取50ug蛋白上样,加入5ul上样缓冲液,沸水浴5分钟,瞬时离心后上样。12 170V恒压电泳至溴酚蓝至凝胶前沿。13 染色1小时 14 脱色至条带清晰,背景明亮为止。结果: ...
如何利用大肠杆菌做寄主进行DNA克隆并使
外源基因
得到
表达
答:
将目的目的基因克隆在载体质粒上,然后将载体质粒转入大肠杆菌中,选择成功转入质粒的大肠杆菌进行培养,就可诱导目的
基因的表达
了
微生物
表达外源基因
需要注意什么
答:
表达的外源基因
是什么,对宿主细胞是不是有害,会不会形成包涵体,产物是存在于细胞内还是分泌到细胞外,总之要注意选择好合适的宿主(涉及到真核生物的蛋白,你要考虑翻译后修饰问题,这个时候再用大肠杆菌就不合适了),产物合适的分离方法和菌的最佳培养条件等。
外源基因
在原核细胞中
表达
应具备哪些条件
答:
影响
外源基因
高效表达的各种因素: 一、外源基因的表达效率 ①启动子的强弱。有效的转录起始是外源基因能否在宿主细胞中高效表达的关键
步骤
之一,也可以说,转录起始的速率是
基因表达的
主要限速步骤。
什么是DNA直接转化法?
答:
DNA溶液,逐滴加入到不断搅拌的Hepers—磷酸钙溶液中,形成DNA—磷酸钙共沉淀复合物,然后用吸管将沉淀复合物黏附在哺乳动物单层培养细胞的表面上,保温几小时后,用新鲜培养液洗净细胞,再用新鲜培养基继续培养,直至
外源基因表达
。
利用
外源基因
在受体细胞中
表达
,可生产人类所需要的产品。下列各项中能...
答:
答案D
基因的表达过程
是翻译形成蛋白质,干扰素是蛋白质是翻译场所,而抗虫基因检测到是导入成功,A选项错误;胰岛素基因是导入成功,信使RNA是转录成功,B选项不正确;C选项是导入成功,错误,D选项正确。 考点: 考查目的基因检测和表达。点评: 目的基因成功表达是翻译形成相应的蛋白质。
两种方法的区别为什么以目的
基因
转录成的mRNA为模
答:
基因表达
分为转录及翻译两阶段,转录是以DNA(基因)为模板生成mRNA
的过程
,翻译是以mRNA为模板生成蛋白质的过程,检测
外源基因的
表达就是检测特异mRNA及特异蛋白质的生成。所以基因表达检测分为两个水平:即转录水平上对特异mRNA的检测和翻译水平上对特异蛋白质的检测。转录水平上的检测主要方法是Northern...
λDNA载体不适合
表达外源基因的
原因
答:
λDNA载体不适合表达
外源基因
的原因如下: 1、阅读框架对转化
基因表达的
影响,外源基因的编码区只有与表达载体DNA的起始密码相吻合时,才能正确的转译出蛋白质。2、顺式作用元件对基因表达的影响,是在转录水平上对基因表达有调节活性的DNA序列。3、翻译
过程
对表达的影响,翻译起始区有无二级结构影响结构...
外源基因
是什么
答:
外源基因
是存在于生物的基因组中、原来没有的外来基因。也指经转
基因步骤
导入受体细胞的基因。可以通过基因操作获得。目的基因就是指基因工程中要
表达的
基因。因此,外源基因的范围大,包含目的基因在内,同时也包括受病毒感染的细胞中病毒的基因也属于外源基因。http://zhidao.baidu.com/link?url=Mc_t3...
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