非常风气网www.verywind.cn
首页
病毒转染质粒表达时间
shrna
质粒转染
多久效果最好
答:
72小时
。在转染shrna质粒后,需要72小时让质粒在细胞内表达,所以shrna质粒转染72小时效果最好。转染是使用非病毒感染的手段人工引入核酸(DNA或RNA)进入细胞的过程。
转染
是什么意思
答:
为了提高转染效率,通常使用超螺旋质粒DNA,这是一种紧密的质粒形态,可以更好地进入宿主细胞。
在转染后24-72小时内
,可以通过报告系统如荧光蛋白、β半乳糖苷酶等来检测基因表达的水平。2、稳定转染 稳定转染是指外源DNA既可以整合到宿主染色体中,也可能作为一种游离体存在。在稳定转染中,外源DNA的整合...
质粒转染
的操作步骤有哪些?
答:
转染两大类型:瞬转: 非整合,短暂存在,但表达高效,
1-7天内显现超螺旋DNA优势
。适用于高表达需求,无需筛选。稳转: 持久整合或作为辅助载体,表达持续,但需筛选,适合稳定表达需求。转染方式各有千秋:化学转染: 快速,重复性强,但血清影响效率,须谨慎操作。生物转染: 针对难转染细胞,高效且生物安...
转染
的cas9
质粒
在细胞中能复制吗
答:
脂质体转染:在转染24小时后
,消化细胞并计数.将细胞种到96孔板,保证每个孔2-3个细胞,这样才能得到单克隆.待细胞贴壁后,加入抗生素筛选.筛选时间和浓度视细胞而定.一般G418一个星期作用,嘌呤霉素2-3天.脂质体法筛单克隆时间较长,且效率低,大概只有1%.病毒转染:先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出...
用何种方法使的比细胞内的一种蛋白过
表达
。。。
答:
得到的产物整合到
表达
载体上(该步为载体构建,载体可以是
质粒
,腺
病毒
或慢病毒等,一般可以委托公司构建,比如英骏公司构建的载体比较常见),再把构建的新载体用电
转染
、脂质体或磷酸钙的方法转至想要表达的细胞内,转染2天后就可以检测靶蛋白的表达(根据需要可以做成瞬时转染或稳定转染)...
慢
病毒
载体认识
答:
由HIV-1基因组去除了包装、逆转录和整合所需的顺式作用序列而构建,能够反式提供产生
病毒
颗粒所必需的蛋白。包装成分通常被分开构建到两个质粒上,一个
质粒表达
Gag和Pol蛋白,另一个质粒表达Env蛋白,其目的也是降低恢复成野生型病毒的可能。将包装成分与载体成分的3个质粒共
转染
细胞(如人肾293T细胞),即可在细胞上清中...
crispr cas9基因敲出
质粒转染
可以构建稳定细胞株吗
答:
脂质体法筛单克隆
时间
较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染
:先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.病毒转染得到稳定...
质粒转染
和
病毒转染
有什么本质上的区别
答:
两者在本质上并没有区别。无论是
质粒转染
,还是
病毒转染
,均是真核细胞主动或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因
表达
、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中,其应用越来越...
转染
293t多长
时间
能产生慢
病毒
答:
一般认为,在
转染
后的第24~48 h之间,是慢
病毒
的生产高峰,这时病毒产生速率高于降解速率。可以在这个
时间
收获第一批慢病毒,此时也是滴度最高的时候。在随后的 48~72 h中,包装依然持续进行,但滴度下降(生产能力下降,但降解速率不变)。从产量角度而言,在这24 h内,可以使用小体积的培养基收获1~...
psiCHECK-2
质粒转染
细胞后,用什么药物筛选稳定克隆
答:
脂质体法筛单克隆
时间
较长,且效率低,大概只有1%.
病毒转染
:先要用包装细胞,一般为293细胞,包装出病毒,再用病毒转染目的细胞.包装病毒视不同类型的病毒而定,一般要3-5天的时间.包装好的病毒要测滴度,根据滴度决定转染目的细胞的病毒量.转染目的细胞1-2天后加抗生素筛选得到稳定细胞株.病毒转染得到稳定...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
涓嬩竴椤
灏鹃〉
你可能感兴趣的内容
慢病毒转染和质粒转染
质粒转染和病毒转染的区别
质粒转染与慢病毒转染的区别
转染质粒多少小时表达
病毒质粒转染
慢病毒质粒直接转染细胞
腺病毒和质粒转染
质粒转染时间
三种质粒共转染
本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
©
非常风气网