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真核基因为什么选用原核表达系统
为什么
要让
真核
生物的
基因
在
原核
生物中
表达
并纯化蛋白呢?
答:
实际上真核生物的蛋白也可以用真核细胞蛋白表达系统来实现,而且效果往往更好。
用原核生物来表达主要还是因为操作简单,快速
。如果希望表达和纯化的蛋白性质稳定,经原核系统表达之后仍然有正确的折叠构象,那么使用原核表达系统就很合适了。
为什么
常用
原核
细胞做
表达
?
答:
原核生物培养起来很容易!常用的
原核表达
菌体为大肠杆菌,它无处不在,只需一点泡豆芽的水就能生存,所以培养起来很容易!最后只需要将菌体裂解就可以收获大量的表达产物!但
真核
生物的
基因
不能用原核细菌表达,否则无活性(真核含内含子且表达蛋白需修饰)!
真核原核表达系统
的优缺点?
答:
其优点在于能够在较短时间内获得基因表达产物,而且所需的成本相对比较低廉
。但与此同时原核表达系统还存在许多难以克服的缺点:如通常使用的表达系统无法对表达时间及表达水平进行调控,有些基因的持续表达可能会对宿主细胞产生毒害作用,过量表达可能导致非生理反应,目的蛋白常以包涵体形式表达,导致产物纯化困难;而且原核表达...
真核基因
在
原核
中
表达
需要
什么
原理
答:
第一,克隆到原核表达系统中的序列必须是去掉内含子的cDNA序列.
因为原核表达系统
没有剪切修饰内含子的相关酶系统.第二,要用原核的启动子.检查一下
真核基因
密码子偏好是否存在原核表达系统的稀有密码子.那个稀有密码子的氨基酸会成为表达量的瓶颈.如果有,点突变之.第三,真核基因可能在表达过程中需要有分子...
...核生物中
表达
吗?
原核
生物能在
真核
生物中表达吗?
为什么
?
答:
接下来要分的就是表达系统是原核表达系统还是真核表达系统,现在用的最多的是原核表达系统,
因为操作简单方便而且节约成本
,表达出来的蛋白能做抗体能够满足绝大多数的实验需求。如果你要表达的蛋白需要复杂修饰且下游应用要求高(比如制药,疫苗研究等)这个就要选择真核表达系统,真核系统表达的蛋白近似于...
真核
表达系统与
原核表达系统
的异同?
答:
1、
真核基因
与
原核
基因的调控一样,都是以转录水平调控为最重要;2、结构基因均有调控序列,并依靠特异蛋白因子与这些调控序列的结合与否调控基因的表达;3、都要经历转录、翻译过程;4、表达过程都有复杂性、多环节。真
核表达系统
和原核基因表达调控的不同点:1、真核基因表达调控过程更复杂;2、在...
相比
真核
表达系统,
原核表达系统
的劣势体现在
答:
相比真核表达系统,
原核表达系统
的劣势体现在具体如下:一、原核表达体系 1、E.coli是当前采用最多的原核表达体系,其优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产工艺,其缺点为:由于缺乏转录后加工机制只能表达克隆cDNA,不宜表达
真核基因
组的DNA;由于缺乏适当的翻译后加工机制,表达产物无修饰过程...
原核表达系统
有哪些
答:
1. 大肠杆菌表达系统是目前应用最广泛的一种
原核表达系统
。大肠杆菌具有生长迅速、容易培养、遗传背景清晰等优点,可以有效实现外源
基因
的高效表达。但需注意,使用大肠杆菌表达系统可能会出现蛋白质异源性等问题。2. 酵母表达系统是一种较常用的
真核
表达系统,也属于原核表达系统的一种。酵母具有生长快速、...
基因工程问题,
真核基因
在
原核
细胞中如何
表达
答:
一、请删去
基因
中的内含子。这可以通过将该基因的cDNA连接至载体中而解决。二、所用的表达载体中,你所需要表达的基因必须由宿主菌能够使用的原核启动子来启动。一般商业的
原核表达
载体均有这类启动子。三、如果你需要表达的基因与宿主菌的密码子偏好有很大的不同,则需要更改这些密码子一适应宿主菌。
真核
生物的
基因
在
原核
生物中
表达
,大致采用
什么
路线?
答:
同意楼上的意见,不过,在
原核
生物中
表达真核基因
可以利用包含体的方法,直接将真核生物的基因克隆出来,通过载体或者是质粒转移到原核细胞中去,通过DNA翻译表达出来的蛋白质
因为
没有正确的空间折叠,所以不具备生物活性,只能分泌到细胞质中,形成包含体,工业上将细胞破碎后收集包含体,通过一系列方法使...
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