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真核基因的原核表达
真核基因
在
原核
细胞中
表达
需要解决哪些问题
答:
第一,克隆到
原核表达
系统中的序列必须是去掉内含子的cDNA序列.因为原核表达系统没有剪切修饰内含子的相关酶系统.第二,要用原核的启动子.检查一下
真核基因
密码子偏好是否存在原核表达系统的稀有密码子.那个稀有密码子的氨基酸会成为表达量的瓶颈.如果有,点突变之.第三,真核基因可能在表达过程中需要有分子...
基因工程问题,
真核基因
在
原核
细胞中如何
表达
答:
一、在基因工程中,内含子的存在可能会干扰
真核基因
在原核细胞中的
表达
。为了克服这一问题,可以移除基因中的内含子,并通过将
基因的
编码序列(cDNA)连接到表达载体中来实现。二、为了确保真核基因在原核细胞中有效表达,选择的表达载体应含有宿主菌能够识别并使用
的原核
启动子。市售的表达载体通常已经包含...
基因工程问题,
真核基因
在
原核
细胞中如何
表达
答:
一、请删去基因中的内含子。这可以通过将该
基因的
cDNA连接至载体中而解决。二、所用的表达载体中,你所需要
表达的
基因必须由宿主菌能够使用的原核启动子来启动。一般商业
的原核表达
载体均有这类启动子。三、如果你需要表达的基因与宿主菌的密码子偏好有很大的不同,则需要更改这些密码子一适应宿主菌。
真核
生物的
基因
在
原核
生物基因进行
表达
时的注意事项 有哪些
答:
1,选对插入序列,克隆构建好后,测序,看你插入到
原核
载体中的序列是否正确、完整,有无移码和各种突变,起始密码子和终止密码是否正确;2,所选
的表达
体系是否合适,有时,你需要
表达的基因
可能来源于
真核
生物的线粒体或叶绿体,其中是否有稀有密码子,否则会影响表达效率,表达的蛋白是可溶的还是包涵体,是否需要...
真核
生物的
基因
在
原核
生物中
表达
,大致采用什么路线?
答:
同意楼上的意见,不过,在
原核
生物中
表达真核基因
可以利用包含体的方法,直接将真核生物的基因克隆出来,通过载体或者是质粒转移到原核细胞中去,通过DNA翻译表达出来的蛋白质因为没有正确的空间折叠,所以不具备生物活性,只能分泌到细胞质中,形成包含体,工业上将细胞破碎后收集包含体,通过一系列方法使...
根据
真核基因
在
原核
细胞中
表达
的特点,表达载体必须具备那些条件?_百度...
答:
【答案】:(1)能够独立的复制;(2)具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记,以利于外源
基因的
克隆、鉴定和 筛选;(3)应具有很强的启动子,能为大肠杆菌的RAN聚合酶所识别;(4)应具有阻遏子 (5)应具有很强的终止子 (6)所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号。
真核基因
在
原核
系统
表达
的主要步骤
答:
从技术上常用的流程大概就是:①目的
基因
连接上载体,②将载体(通常为质粒)转染细菌,③培养并富集目的细胞,④检验
表达
效率。(各个流程几乎都有很良好的试剂盒可以直接使用,操作流程也很简单)而目的基因在
原核
细胞中是以质粒的形式单独存在,而且常常有多个拷贝,其表达过程也是通过转录成RNA,然后再...
真核
生物
基因
在
原核
生物里
表达
应如何操作
答:
通过基因工程手段,用特定的限制性内切酶,切割目的基因和质粒载体,然后用DNA连接酶连接,用氯化钙或者电刺激处理
原核
生物细胞,把带有目的
基因的
载体导入原核生物即可.
真核原核表达
系统的优缺点?
答:
为克服上述不足,许多学者将
原核
基因调控系统引入
真核基因
调控领域,其优点是 ①根据
原核
生物蛋白与靶DNA间作用的高度特异性设计,而靶DNA与真核基因调控序列基本无同源性,故不存在
基因的
非特异性激活或抑制 ②能诱导基因高效表达,可达105倍,为其他系统所不及; ③能严格调控
基因表达
,即不仅可控制基因表达的“开关”,...
真核
细胞的
基因
导入到
原核
生物中,能
表达
么
答:
不能。因为
真核
生物的
基因
中有内含子,而
原核
生物不具有将内含子转录的部分进行加工的功能,所以真核生物的基因要想在原核生物细胞中
表达
,必须是人工合成的,而不能将原来真正的完整的基因导入原核生物的细胞中。
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