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蛋白表达要去除信号肽吗
我的序列含有信号肽,能够
表达蛋白吗
?是否是必须把
信号肽去掉
?
答:
信号肽一般都是用来穿膜定位用的,如果你只是为了表达获得这个蛋白,而不需要把该蛋白定位到他应该在的细胞器上的话,
建议把信号肽切掉
。
原核
表达信号肽
没
去掉
影响
答:
影响表达
。信号肽是一种能够指导蛋白质在细胞内定位的信号序列,其位于蛋白质的氨基端。蛋白质通常是通过信号肽导向到细胞质中进行表达。因此,如果信号肽没有被去除,蛋白质就会被停留在原核细胞质中,而不会被正确的转运到目标位置,从而影响表达。可以使用天然的信号肽剪切酶或进行胰蛋白消化等方法去除...
做
蛋白
在真核细胞的
表达
,但是表达量很低,怎么解决
答:
有的时候在不同的
表达
体系里面对
蛋白
的表达量是有影响的。当构建完成后携带有信号肽的时候,一些蛋白在真核表达体系中表达量极低。
去除信号肽
序列值后,直接表达成熟肽,表达水平明显提高。所以说构建的真核表达载体高表达mRNA却检测不到目的蛋白是完全有可能的。
信号肽
在
蛋白表达
过程中的作用是什么?
答:
信号肽
是在蛋白质合成过程中起到导向作用的短肽段,它在蛋白质翻译和定位中起着重要作用。在蛋白质合成过程中,信号肽可以将正在合成的蛋白质引导至内质网,细胞器或细胞膜中的特定位置。一旦蛋白质达到目的地,信号肽被剪切掉,而蛋白质则可以完成定位和功能。因此,信号肽在
蛋白质表达
过程中的作用包括...
在预测
蛋白质
三维结构之前是不是要先
去掉信号肽
答:
应该要的
,这样可以排除干扰
杆状病毒表达系统的影响
蛋白质表达
的因素
答:
可考虑
去除
这类
信号肽
;⑧若
表达
产物不能稳定表达时,可对其N端进行改造或表达融合蛋白。除此以外,细胞的种类和生理状态也是重组病毒繁殖的关键因素。
蛋白质
的低水平表达可能还与转录后加工、蛋白质转运、以及蛋白质本身的性质相关,可以采用融合表达来解决。
原核
表达
为什么
去除信号肽
?
答:
你想用信号肽把
蛋白表达
到哪里呢?细胞没有核膜,缺少细胞器 通常做细胞内表达不
需要信号肽
的定位作用 多余的信号肽不能被细胞识别切除 有可能影响蛋白质的正确折叠 从而产生一系列问题
真核
表达
,设计载体的时候
需要
把
信号肽
设计进去吗?
答:
很多都是分泌性表达时起到分泌作用的
信号肽
,你只
需要
保留一个信号肽就可以了。我建议你保留载体上面的信号肽。目的基因的功能主要是编码基因区的氨基酸序列来实现的,有他们在就可以保证基因
表达蛋白
功能的正常了。我们一般设计质粒构建的时候也是把基因自身信号肽给
去掉
,只要蛋白功能区序列就可以了。
大肠杆菌中
信号肽
一定会被切除吗
答:
大肠杆菌中
信号肽
是否会被切除,要看目的
蛋白
是否成功分泌了 一般大肠杆菌做分泌
表达
也只能分泌到周质空间中,不会到培养基里面。如果目的蛋白成功分泌到了周质空间,那信号肽一定会被切除的。如果最后表达目的蛋白还留在胞内,那信号肽一般是不会被切除的。
膜
蛋白表达 要
加
信号肽吗
?
答:
我用的大肠杆菌
表达
系统,设计表达引物时就
去掉
了
信号肽
序列。不
需要
。
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