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DNA提取中裂解液要多久
血
液提取DNA的
有关问题
答:
X?
100)中裂解10 min
,其间轻轻用力充分混匀,室温10 000 r离心2 min,沉淀要用Tris 缓冲液I洗2次。将沉淀用220 μl的Tris 缓冲液II (10 mmol/L Tris?HCl,pH 8.0;10 mmol/L 氯化钾;10 mmol/L 氯化镁;2 mmol/L EDTA,pH 8.0;0.4 mol/L 氯化钠;10 g/L SDS)悬浮,轻轻振荡试...
DNA提取
过程中的关键步骤及注意事项有哪些
答:
5-10分钟
,取上层清液于干净离心管中。8. 加入等体积氯仿(氯仿:异戊醇(阻止氯仿挥发)=24:1),轻摇,缓慢颠倒混匀 10min,13000-15000rpm离心5-10min。取上清液加入1/10体积2M NaCl和等体积-20℃保存的无水乙醇(或等体积异丙醇)(沉淀DNA),沉淀DNA 10min,13000rpm离心5min,去上清,加...
贝类
dna提取
方法
答:
1.2
DNA提取
将组织剪成碎块,置于液氮中冻结后,用预冷的研钵将组织研碎,用1.2ml消化缓冲液(100mmol/L NaC1,10mmol/L Tris-C1,25mmol/L EDTA,5g/L SDS,0.1g/L蛋白酶K)悬浮,置于50℃下温育15h,直至组织块完全破裂,
裂解液
变清。用等体积酚\氯仿\异戊醇抽提上述样品,8000r/m...
DNA
抽提方法与步骤
答:
1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。2.用冷酒精
提取
出含杂质较少的DNA。3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。 5 min 2.溶解DNA:3.析出含
DNA的
黏稠物:蒸馏水300mL,逆时针方向搅拌,缓慢 4.过滤:取黏稠物 5.再溶解:顺时针方向搅拌...
粪便
DNA
如何采集
答:
研磨 , 取研磨后的粪便约 200mg 提取 DNA 。4. 加入 200μL
裂解液
Ⅰ,悬浮沉淀,37℃放置 30 分钟。5. 加入 200 μL 裂解液Ⅱ, 20μL 消化液,充分振荡混匀,56℃水浴 10 分钟。6. 加入 600μL 析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响
DNA 的提取
与后续实验。7. 将吸附...
真菌的
DNA提取
方法有哪些,要详细操作步骤
答:
DNA提取液
:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS,3M NaAc (二)1.真菌菌丝0.5-1 g, 在液氮中迅速研磨成粉 2.加入3 mL 65℃预热的DNA提取缓冲液,快速振荡混匀65℃水浴30 min, 期间混匀2-3次 3.加入1 mL 5M KAc,冰浴20 min 4.等体积的氯仿:异戊醇(...
提取
的植物
基因组DNA
干后为白片
答:
注意pH值,细胞
裂解液
7.5,饱和酚8.0,另酚仿提取离心后取上清,建议缓缓滴入盛有1mL -20°C 异丙醇的Eppendorf管中,静置10min,将析出的絮状DNA挑至一干净Eppendorf管中,70%乙醇洗涤一次即可。这样操作其实很快,十字花科的叶片
提取DNA
很快,在油菜、甘蓝、拟南芥中都没问题。
提真菌
DNA
时
需要
缓冲液和
裂解液
,但我查不到如何配,就是具体加Tri-Hcl...
答:
这是我提真菌
DNA
做ITS时用的提DNA方法:1M Tris-cl(PH 8.0)100 ml:12.11g Tris碱;ddH2O ,80ml;HCl,4.9 ml三者混匀充分溶解后,滴加浓盐酸调PH至8.0,定容至100ml;0.5M EDTA(PH 8.0) 100ml:在80ml水中加入18.01g EDTANa2.2H2O搅拌溶解,用NaOH调PH至8.0(约2gNaOH颗粒)...
请教:细菌
DNA的提取
答:
CTAB/NaCl法
提取
的
DNA
纯度较高,蛋白杂质较少,保存时间长,编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候,这样最后没有RnaseA污染。每一步操作细致一些,得到的DNA可用于Southern blot。注意:长时间保存DNA可放于-20℃,但要尽量减少反复冻融,否则影响DNA质量。三、盐析法 介于方法一...
基因组DNA提取中
细胞
裂解液
怎么配制
答:
主要根据不同的目的,
裂解液
的组成有所不同,主要有
提取
核酸和蛋白两中。在提取RNA或
DNA
时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸;如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等。以下是细胞裂解中常用试剂和其作用:50 mM Tris-HCl ...
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