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TA克隆的读音
TA克隆的
具体原理是什么?
答:
TA克隆
方法(OriginalTACloningKit)把PCR片断与一个具有3‘-T突出的载体DNA连接起来的方法。因为PCR反应中所使用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3'加上A。例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。只有用经过特殊处理的具有3’-T突...
taq怎么读
答:
运用
TA克隆的
方法将扩增片段插入PGEM-T-easy载体中,在Genebank中全序列分析表明扩增出的hINS与其中一个发表序列完全吻合,而与另外的一个发表序列同源性为99%,不同的碱基其中一处是位于内含子,其它三处位于等位多变点,
什么是
T-A克隆
?
答:
1.
TA克隆
技术利用Taq聚合酶的双重功能,即它既能进行DNA合成,又能催化末端连接反应。2. 在PCR扩增产物上,Taq聚合酶会在3'端自动添加一个腺苷酸(A)突出端。3. Invitrogen公司的TA克隆系统和山羊Topo TA克隆系统都提供了一种线性载体,其3'端含有胸腺苷酸(T)突出端,能够直接高效地连接PCR产物。
ta克隆的
优缺点
答:
2、不需使用含限制酶序列的引物,不需将PCR产物进行优化,不需把PCR产物做平端处理,不需在PCR扩增产物上加接头,即可直接进行
克隆
。
ta克隆的
目的
答:
TA克隆
适用范围 TA克隆适用于可扩增短DNA序列的热稳定TaqDNA聚合酶。该酶缺乏3’→5’校对活性,并具有可在扩增子3’末端额外添加脱氧腺嘌呤的末端转移酶活性。得到的具有3′dA突出端的PCR产物连接到含有突出互补3’脱氧胸腺嘧啶突出端的线性TA克隆载体中。优点:不需要引物和特定的酶切位点序列,简单...
TA克隆的
定义是什么?
答:
T-A克隆
法就是用改良碱裂解法抽提pBluescript SK(+)质粒,用EcoRⅤ将pBluescript SK(+)质粒切成平端,利用Taq DNA聚合酶及dTTP制备pBluescript SK(+) T-A载体. 将β-actin cDNA片段克隆入自制的pBluescript SK(+) T-A载体,经EcoRⅠ及HindⅢ双酶切得到与设定长度一致的β-actin cDNA片段.对...
DNA切胶回收,两端加A是什么意思,有什么作用?
答:
这个一般是为了接下来将得到的目的片段进行
TA克隆
。TA克隆 把PCR片段与具有3'-T突出端的载体DNA连接起来的实验方法。T载体是带有3'-T突出端的开环载体,PCR产物3'末端具有一个非模板依赖的A,在连接酶作用下,把PCR产物直接插入到质粒载体的多克隆位点中。
什么是T-
克隆
载体和U-克隆载体?
答:
用于
TA克隆的
载体被称为T-克隆载体,它的出现使PCR产物的克隆更加简便快捷。如pGEM-3Z4Z载体由pUC1819增加了一些功能片段改造而来,大小为2.74kb。与pUC1819相比,在多克隆位点的两端添加了噬菌体的转录启动子,如Sp6和T7噬菌体的启动子(link:xlinkhref=i010801图4-8link),便于克隆片段的测序。...
如何提高PCR产物
克隆的
效率
答:
(1)PCR产物的酶切和判断比较困难。(2)另外酶切连接过程本身也相当地费时费力。【
TA 克隆
】TA 克隆方法( Original TA Cloning Kit )即利用 Taq 聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,在每条 PCR 扩增产物的 3` 端自动添加一个 3`-A 突出端。利用 TaKaRa 的 T 载体,直接高效地连接 PCR 产物...
TA克隆
出现假阳性的原因有哪些?
答:
作为常规的
TA克隆
法,所需连接时间较长,因载体自连而造成较多的假阳性,这句摘自http://www.bio-toyobo.cn/origin/protocol/TAK.pdf 你再看看http://www.takara.com.cn/bbs/showtopic.asp?TOPIC_ID=2399&Forum_ID=1能不能有什么收获。参考资料:http://zhidao.baidu.com/question/59941836.html...
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