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coli表达体系
试述
原核表达体系
和真核表达体系各自的优、缺点。
答:
【答案】:原核表达体系如E.coli是当前采用最多的原核表达体系
,其优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产工艺。其不足之处是由于缺乏转录后加工机制,只能表达克隆的cDNA,不宜表达真核基因组DNA(即含有内含子的DNA);表达的真核蛋白质不能形成适当的折叠或进行糖基化修饰;表达的蛋白质常常...
相比真核
表达
系统,原核表达系统的劣势体现在
答:
一、原核表达体系
1、E.
coli是当前采用最多的原核表达体系
,其优点是培养方法简单、迅速、经济而又适合大规模生产工艺,其缺点为:由于缺乏转录后加工机制只能表达克隆cDNA,不宜表达真核基因组的DNA;由于缺乏适当的翻译后加工机制,表达产物无修饰过程,分子构型可发生改变。2、表达的蛋白质常常形成不溶性...
大肠杆菌(E.
coli
)蛋白
表达
的常用载体
答:
大肠杆菌(E.
coli
)因其低成本和快速的
表达
速度,常被选为小分子细胞质蛋白或结构域表达的理想宿主。利用大肠杆菌生产蛋白质,主要步骤包括:首先,将编码目标蛋白的质粒导入细菌;然后,在细胞生长到适宜数量时诱导蛋白表达。在选择载体时,关键因素是启动子和工程化克隆位点。常用的大肠杆菌表达载体分为...
试述采用E.
coli表达
有用的蛋白质必须使构建的表达载体具备哪些主要条 ...
答:
【答案】:运用E.
coli表达
有用的蛋白质必须使构建的表达载体具备下列主要条件:①含大肠杆菌适宜的选择标志;②具有能调控转录、产生大量mRNA的强启动子,如lac、tac启动子或其他启动子序列;③含适当的翻译控制序列,如核蛋白体结合位点和翻译起始点等;④含有合理设计的多接头克隆位点,以确保目的基因按...
原核
表达
发现在37℃诱导不出来原核表达测序回来如何判断蛋白译码_百度...
答:
在原核蛋白表达体系中,如E.coli(大肠杆菌表达系统),外源基因通常需要诱导剂的诱导才能进行表达
,本文详细讲述了常用诱导剂IPTG 诱导原理,对外源蛋白诱导表达原理以及实验步骤。原核生物绝大多数的基因按功能相关性成簇地排列,且密集于染色体上,共同形成一个转录单位——操纵子,也称基因表达的协同单位。
用于生产人用药物的哺乳动物细胞有哪些种类?举例说明哺乳动物细胞生物技 ...
答:
大肠杆菌(E.
coli
)是使用最早的
表达
系统,其显著优点是易于操作,产量高,成本低,但由于用E.coli生产的蛋白质药物因缺乏糖基化而在人体内易被降解,因此它的药放大大降低。此外,它还存在易产生内毒素和包涵体的问题。真核细胞中CHO细胞是目前重组糖基蛋白生产的首选
体系
;因为与其他表达系统相比,它具有...
σ因子
coli
启动子与σ因子的关系
答:
在E.
coli
中,有17个热休克基因,其中htpR是主要调节器,其产物σ32,一种变异的σ因子,负责热休克反应。正常情况下,σ32不稳定,其
表达
量可以通过调控来快速变化。它引导核心酶在热休克基因的启动子处启动转录,这些启动子与普通启动子的顺序不同,特别是-10序列差异显著。E. coli的σ60因子在氮...
衰减作用如何调节 E.
coli
中色氨酸操纵子的
表达
?
答:
当有色氨酸存在时,色氨酸-tRNA是负载的,可以为该位点提供充足的翻译原料。这时,核糖体可以顺利通过区域1,停留在区域2上,此结构导致区域1和2不能互补配对,而3和4配对,3和4配对区间GC含量较高,且4区后有一连串U,形成一个典型的强终止子序列,造成转录中RNA聚合酶的解离,终止转录。而当色氨酸...
遗传转化的基本知识(四)——植物遗传转化的载
体系
统
答:
植物转化载体系统包括一元载体系统和双元载体系统。双元载体系统中,微型Ti质粒和辅助Ti质粒构成,T-DNA和Vir基因分别位于两个独立的质粒上,通过反式激活T-DNA转移到植物细胞基因组内。这类转化
体系
构建相对简单,转化效率高于一元载体系统。微型Ti质粒和辅助Ti质粒可通过直接转化农杆菌或三亲交配方法导入。
"E.
COLI
"代表的中文是什么?
答:
E.
COLI
,全称为Escherichia
coli
,中文直译为“大肠杆菌”。这个英文缩写词在医学领域中被广泛使用,特别是在实验室操作和细菌研究中。它代表的英文单词是一种常见的肠道细菌,对人体健康有重要影响。在医学上,E.COLI被证实具有抑制金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌以及对某些白血病细胞的效应。此外,它还被用于...
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