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flowjo的fsc和ssc
FlowJo
分析细胞周期,教程详解!
答:
首先,安装
FlowJo
X软件在电脑上。导入需要分析的流式周期fcs文件,通常通过点击图标进行操作。打开文件,调整X轴(
FSC
-A)和Y轴(
SSC
-A),确保线性轴设置正确。选择圈门方式,圈定合适的细胞群体。进入新界面,圈定单个细胞(single cells)。在主界面,右键单个细胞,选择cell cycle功能。随后,点击OK...
flowjo
数据处理过程?
答:
首先,打开
FlowJo
,进入工作台,你需要找到你的原始数据,通常以fcs格式存储。点击Ctrl+A全选所有文件,然后直接拖拽到All Samples区域,如图像所示。在数据预处理阶段:1. 创建散点图 - 点击fcs文件,你会看到默认
的SSC
(侧向散射)在X轴,
FSC
(前向散射)在Y轴。这两个参数揭示了细胞的大小和复杂度。
新手流式细胞周期
flowjo
分析求助
答:
如果是PI单色流式分析细胞周期,应该如下几个步骤:第一,在
FSC
-A/
SSC
-A散点图上划出细胞门,排除细胞碎片和大的团块。第二,把第一步得到的细胞群在SSC-W/SSC-H散点图上划出单细胞门,特点是SSC-W比较窄。第三,把第二步得到的单细胞在FSC-W/FSC-H散点图划出更进一步的单细胞门。第四,...
flowjo
如何把虚线显示出来
答:
1、点击“T”按钮,选择“用线性轴(UseLinearAxis)”或者“用Log轴(UseLogAxis)”。2、点击“T”按钮,选择“Changedisplayedparameterrange”3、在弹出的对话框中,输入参数轴范围的最小值和最大值。4、调整前,
FSC
参数轴的最大值为16777216,
SSC
参数轴的最大值为16777216;调整后,FSC参数轴的最大...
flowjo
没tool
答:
flowjo
没有tool。
Flowjo
可以读取FCS格式的文件,流式细胞仪都产生这个格式的文件。把FCS文件导入Flowjo后,双击导入的文件,默认打开的是
FSC
,
SSC
点状图,可以根据具体的使用更换坐标,或者设定gate。
流式图的排版
答:
一、在进行不同的亚群划分时,通常是先
SSC
/
FSC
进行画门,严格情况下,有人还会使用DAPI来区分死细胞,然后再在该门中进行目标细胞亚群的划分。二、从流式细胞仪中直接拷出来的流式图,或者是经
Flowjo
编辑过的流式图通常无法直接放在文章中,需要放在AI或PS中进行进一步的编辑与排版,例如每个样本的流...
求分析流式细胞周期数据,FCS文件
答:
第二,染色很差,用PI染色无法看到细胞周期。第三,在采集数据的时候,没有设置单细胞gate。建议你重新做实验。尤其是染色的时候注意采用正确的步骤。上机采集数据的时候,要记录
FSC
-W, FSC-H,
SSC
-W, SSC-H。如果你的机器无法记录这些参数,至少要记录PI通道的W。这样才能判断单细胞。
如何分析流式细胞仪检测t淋巴细胞亚群结果
答:
最常见的是分析CD4, CD8亚群。先在
FSC
,
SSC
散点图上划出淋巴细胞gate。然后在此gate基础上选取T细胞标志染色阳性的细胞群(一般是CD3)。在把CD34阳性的细胞根据CD4 和CD8染色情况形式为散点图,得到CD4+/CD8-, CD4-/CD8+, 以及双阳性的比率。如果还有其他细胞标志的染色,再进一步分析。
flowjo
分析流式数据怎么除掉死细胞
答:
死细胞一般要通过染料染色,比如PI阳性的细胞,来排除。如果没有事先染色,只是通过
FSC
-
SSC
来看,会很不准。
flowjo
10数据显示不出来
答:
解决方法:把FCS文件导入
Flowjo
后,双击导入的文件,默认打开的是
FSC
,
SSC
点状图,你可以根据具体的使用更换坐标,或者设定gate。
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