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pcdna3.1载体说明书
pcDNA3.1载体
答:
结果 人BACE基因的cDNA已克隆到真核细胞表达
载体pcDNA3.1
质粒中;经脂质体转染COS-7细胞后,并由潮霉素进行筛选,可见转染细胞胞浆中和胞膜上有较高量的BACE蛋白表达。 结论 成功构建了pcDNA3.1-BACE的真核表达载体,为研究BACE基因在AD发病机制中的作用及抑制BACE,为治疗AD奠定一定的实验基础。【关...
pcDNA3.1
(+)-靶基因-SiRNA是什么啊?
答:
pcDNA3.1
(+)是哺乳动物细胞表达
载体
,siRNA是用于RNA干扰的一段长约21-25nt并且和靶基因mRNA的某段序列互补的序列,用于在转录后水平上沉默基因。所以这个“pcDNA3.1(+)-靶基因-siRNA”很可能是一个用于gene knockdown的质粒。参考资料:http://baike.baidu.com/view/212903.htm ...
什么是
pcDNA
?
答:
真核表达
载体pcDNA3.1
-β淀粉样前体蛋白裂解酶的构建及其在COS-7细胞中瞬时表达 【摘 要】 目的 构建β淀粉样前体蛋白裂解酶(β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme, BACE)基因的真核表达载体,为修复阿尔茨海默病(Alzheimer's disease, AD)损伤神经元奠定基础。 方法 采用RT-PCR方法,...
基因克隆
答:
以pcDNA3.1为例,
说明
表达载体中的功能元件(图11)。 表达
载体pcDNA3.1
除了有克隆载体相关元件,如复制起始位点Ori,原核筛选标记Amp外,还有一些其他的功能元件,如表3所示。 表达载体主要用于表达蛋白或者RNA,例如现在基因编辑中常用的一个表达载体PX458(图12),可以同时表达Cas9蛋白和sgRNA。因此上面也会携带一些其他的功能...
pCDNA3.1
(+)和pCDNA3.1(-)
载体
的克隆
答:
后期的
pCDNA3.1
正的与另外一个的负的是相对的,但对于真核细胞上面,上面两个
载体
以及他们的基因构建都是非常近似的 参考资料:教辅用书
载体
是
pcdna3.1
,感受态可以用哪种?有没有特别的限制?很急
答:
你好!一般用于克隆的受体大肠杆菌都可以用,但基本原则是受体菌不能带有质粒上的抗性,否则无法筛选转化子。希望对你有所帮助,望采纳。
pcdna3.1
作为
载体
的重组质粒转入大肠杆菌怎么检测筛选
答:
pcDNA3.1
本身就有抗性,可以用抗性培养基进行初步筛选,然后长出来的克隆筛选,一般为三种:1.设计扩增外源基因片段的引物,进行菌液PCR 2.提取质粒,做质粒双酶切--Hind Ⅲ和EcoRⅠ(这个最为准确)3.设计引物做测序
载体
是
pcdna3.1
,感受态可以用哪种?有没有特别的限制?很急
答:
一般用于克隆的受体大肠杆菌都可以用,但基本原则是受体菌不能带有质粒上的抗性,否则无法筛选转化子。
pcDNA3.0和
pcDNA3.1
的区别?
答:
看invitrogen vector nti的图谱
3.1
+ 3.1-的区别是多克隆位点区域酶切位点顺序是反着的。你翻图谱自己看吧。一般用3.1好了 主要有几点 1 CMV drive expression 2 A+抗性 3 带neo marker 4 带myc tag。
使用
pcDNA3.1载体
转化大肠杆菌后,如何进行筛选?
答:
空
载体
吗?不用筛选 如果你操作没问题的话, 转化率100% ,不过还是要验证的。提质粒做酶切验证了,分别做个单酶切和双酶切。单酶切用来判断质粒的大小,双酶切用来看是否就是该质粒,不过尽量选位点相距较远的酶切位点,100bp以下的小片断电泳很难观察到。
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