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pcr产物连接t载体
pcr产物
只能与
t载体连接
吗
答:
不是。如果
PCR
末端加A的可以用
T载体连接
,
pcr产物
是平端,可以用平端载体连接,但效率低。PCR是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术。
PCR产物
片段链接到
T载体
上后,PCR片段是否会出现两种
连接
方向
答:
PCR产物
片段链接到
T载体
上后,PCR片段是会出现两种
连接
方向。如果用1%的琼脂糖电泳30min,主带(超螺旋的闭环质粒dna)会在3kb-2kbmarker之间,如果是单酶切产物,则应该在3.5kb的marker附近。要连接到载体上,形成带有PCR目标片段的质粒,将这个质粒导入受体菌,才能检测这个片段的活性、作用等等。摘要...
pCR产物
克隆,为什么要克隆
答:
回答:
T载体
又叫T质粒载体,是指T4噬菌体DNA
连接
酶,作用是在有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接. 很多DNA聚合酶在进行PCR扩增时会在
PCR产物
双链DNA每条链的3’端加上一个突出的碱基A。pUCm-T载体是一种已经线性化的载体,载体每条链的3’端带有一个突出的...
为什么
pcr产物
可以直接连
t载体
答:
普通的taq聚合酶会在
PCR
反应过程中在3’末端加入一个碱基A,线性化平末端
T载体
的两端分别又人工加上一个额外的T碱基,从而可与PCR克隆
产物
的A末端互补配对,提高了PCR产物连接和克隆的效率。
为什么
pcr产物
要先连在
t载体
上
答:
T载体
是一种克隆载体,链接后先得到较多的拷贝,可以提高链接表达载体的效率。
T载体
是质粒载体吗
答:
PCR产物
一般和
T载体
相连,T载体是一种线性载体,和你的目的片段
连接
以后,就变成了 圆形的质粒。 T载体的种类很多,takara的书上有很多介绍。
pcr产物
回收与
载体连接
的应用
答:
pcr产物
与
t载体连接
方法很多种:1. 传统方法,也是最经典方法.利用常规taq酶在pcr产物3'末端多加上一个碱基A的特性,开发出3`末端突出一个T的线性化
T载体
。从而利用DNA分子AT互补配对进行连接提高克隆重组效率。2.拓展应用的方法。高保真DNA聚合酶没有在产物末端加多余A的功能,可以考虑反应完成后向产物...
PCR
纯化
产物
为什么能直接
连接
,什么情况下直接连接?求高手指教。_百度知 ...
答:
PCR
纯化
产物
直接
连接
通常分为两种情况,一是TA连接,如phusion,高保真的taq,PCR后会有一个A末端,和
T载体
的T末端互补相连。另一是平末端连接,如pfu,PCR后是平末端,可以和blunt II vector这一类的载体直接相连,但顺序是随机的,可能是正的,也可能是反的。
PCR
的
产物
3末端有A 而
T载体
的3末端有T. 都是3末端,怎么
连接
上呢?
答:
产物
和
载体
都是两条DNA链,产物带A的链与载带T的链互补配对,产物带A的链的互补链(即5‘端)与载体带
T
的链
连接
的,你自己在纸上画画
简述用
T
-克隆
载体
进行
PCR产物
克隆的原理
答:
T克隆的原理是基于常规PCR反应中所使用Taq聚合酶能够在
PCR产物
的3‘末端非特异性添加一个A,这样实际上常规PCR产物都含有3端突出一个A的粘性末端。基于这个原理,常规的线性T-克隆
载体
(PUC18和PUC19等)在其3’末端添加一个T,这样的载体能够和任何PCR产物进行
连接
克隆,并不需要添加任何特异性的粘性...
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