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做原核表达的目的
请教在pMG36E载体上克隆外源基因问题
答:
克隆载体:大多是高拷贝的载体,一般是
原核
细菌,将需要克隆的基因与克隆载体的质粒相连接,再导入原核细菌内,质粒会在原核细菌内大量复制,形成大量的基因克隆,被克隆的基因不一定会
表达
,但一定被大量复制.表达载体就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),是
目的
基因能够表达...
甲型H1N1的知识
答:
1)利用
原核表达
系统(大肠杆菌系统)或真核表达系统(酵母系统)在体外表达猪流感病毒流行毒株的HA基因和NA基因,然后收获、浓缩和纯化
目的
蛋白,再进一步制苗免疫。这种方法的优点是制备过程简单、目的蛋白产量大、主要成分可以定量配置。但由于体外
表达的
蛋白难以维持或恢复天然蛋白的空间结构,蛋白纯化过程复杂、成本高,而且...
我
做原核表达
,PET32a连入
目的
基因用的是BamHI和SalI两个位点,请问表达...
答:
这说明你
的目的
蛋白没有表达,因为PET32a空载
表达的
蛋白就有20KD左右,当然诱导时间长了表达量就会越大
原核表达
载体质粒具有哪些特点
答:
1,能在受体细胞中稳定存在并自我复制 2.具有多个酶切位点 3具有标记基因,启动子,终止子
基因
表达
载体的构建需要哪些工具酶
答:
在分子生物学技术中,作为重要的工具酶被广泛用于建立基因文库、获得
目的
基因等工作。在基因工程中起作用。 解旋酶:是一类解开氢键的酶,由水解ATP来供给能量它们常常依赖于单链的存在,并能识别复制叉的单链结构。在细菌中类似的解旋酶很多,都具有ATP酶的活性。大部分的移动方向是5'→3',但也有3'...
求助:
原核表达目的
蛋白胞内发生降解
答:
原核表达
宿主菌保存条件没有控制好可能导致宿主菌退化,被污染等等,结果。能抑制多长时间你需要自己检测。不同细胞、不同siRNA、不同转染试剂都会影响效率。但是假设你转染之后48小时或者72小时之后passage 细胞做MTT或者克隆形成实验,个人觉得是可以的(前提是你有48小时或72小时knockdown证据)。
目前认为基因
表达
调控的主要环节是
答:
目前认为基因
表达
调控的主要环节是转录起始。基因调控是现代分子生物学研究的中心课题之一。因为要了解动植物生长发育规律。形态结构特征及生物学功能,就必须搞清楚基因表达调控的时间和空间概念,掌握了基因调控机制,就等于掌握了一把揭示生物学奥秘的钥匙。基因表达调控主要表现在以下几个方面:转录水平上的...
请教一些
原核表达的
问题
答:
用pTYB12作载体连一个1900bp左右的片段,转化ER2566,在转化板上挑取阳性克隆后做酶切验证,始终只看到切开的载体片段,没看到
目的
片段;提取阳性克隆的质粒与pTYB12跑胶比对,发现是比载体要大的;做PCR验证也扩出来了1900的条带,阴性对照也没有条带出现;后来试着做了下诱导
表达
,结果没看见诱导条带...
请问表达蛋白时对载体质粒有要求吗,我要
做原核表达
,现有很多质粒可作为...
答:
主要看,你后续实验了,要纯化不?还是要用于制备抗体等。pET32a有个11kDa的用于分泌到膜间腔的导肽,有利于
表达
蛋白的折叠。
求高中生物选修3知识点整理。。
答:
用cDNA文库中分离出
的目的
基因构建
表达
载体时,必须加上 ,否则不能在受体细胞中表达。4、当双子叶植物或裸子植物受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的 化合物,吸引农杆菌移向这些细胞,这时农杆菌的 质粒的 片段会移到受体细胞,并整合到受体细胞的 上。因此,转基因植物常用农杆菌的质粒做为运载体,迄今为止,80%的...
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