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克隆载体有哪些在原核表达系统中
原核表达
时为什么会出现本底表达
答:
脱离操纵。由于原核阻遏蛋白偶尔会脱离操纵子基因,使得操纵子的转录并非完全关闭,仍会有本底水平的表达,
原核表达
,常出现于生物工程中。是指通过基因
克隆
技术,将外源目的基因,通过构建
表达载体
并导入表达菌株的方法。
请问RNA聚合酶如何识别脱氧核苷酸序列 还有 显微注射技术和单
克隆
...
答:
脱氧核苷酸序列就是一小段DNA了,识别就是靠碱基互补配对.显微注射技术是转基因技术中将运
载体
(携带目的基因)导入受体细胞的技术,而单
克隆
抗体使用的是动物细胞融合技术,貌似没有太大的关联...mRNA的问题,如同之前二位所答,分化后的细胞还有大部分同样
表达
的基因(维持细胞生存的必须基因)都会转录出相应的...
科学家在培养转基因植物时,常用什么中的质粒作为
载体
?
答:
科学家在培养转基因植物时,常用细菌中的质粒作为
载体
。解析:细菌属于
原核
生物,原核生物的细胞质中含有质粒(本质是小型双链环状DNA)。
质粒构建的
载体在
基因工程中如何向下遗传,之后如何DNA检测,不是说提 ...
答:
如何遗传?重组质粒,即基因
载体
。是一个复制子,在细胞内可以自主复制,细胞分裂时,质粒随机分配进入子细胞,类似细胞质的母性遗传(如线粒体、叶绿体等)。如何检测?质粒的检测因质粒性质不同而不同,一般人工质粒有抗性基因,可以通过抗性筛选而大致判断。最经典的质粒确认是质粒DNA提取(不含有宿主DNA...
...如何以大肠杆菌质粒DNA为
载体克隆
一个编码动物激素的基因...
答:
用大肠杆菌
表达载体
就行啊!问题就是,ORF要正确,表达的蛋白可能被降解,激素基因要把内含子去掉,启动子、终止子都要用大肠杆菌的等等。
原核
生物细胞是理想受体细胞的原因
有哪些
?
答:
因此普遍作为受体细胞用来构建基因组文库和cDNA文库,或者用来建立生产某种目的基因产物的工程菌,或者作为
克隆载体
的宿主菌。但是,以原核生物细胞来
表达
真核生物基因也存在一定的缺陷,很多未经修饰的真核生物基因往往不能
在原核
生物细胞内表达出具有生物活性的功能蛋白。但是通过对真核生物基因进行适当的修饰...
求助:
原核表达
目的蛋白胞内发生降解
答:
原核表达
宿主菌保存条件没有控制好可能导致宿主菌退化,被污染等等,结果。能抑制多长时间你需要自己检测。不同细胞、不同siRNA、不同转染试剂都会影响效率。但是假设你转染之后48小时或者72小时之后passage 细胞做MTT或者
克隆
形成实验,个人觉得是可以的(前提是你有48小时或72小时knockdown证据)。
基因
克隆
的常用方法有哪几种
答:
这是一套通用方法,简单方便。利用目的基因筛选就要考虑各种情况,很麻烦:能否顺利
表达
(
克隆载体
不表达,
原核
真核,修饰定位、辅因子等等);是否便于筛选(抗生素筛选很方便,如果目的基因是酶、转录因子或结构蛋白,怎么筛选?);不能通用(每研究一种蛋白,就要换一种载体/宿主/筛选方法)...
仓鼠卵巢
表达
大肠杆菌表达 哪个好
答:
第一部分 人β-NGF基因与
原核表达载体
PBV220-β-NGF的构建及其在大肠杆菌中的表达 目的 为β-NGF的基因制药选择一种新方法。方法 设计一对特异引物,直接从人血细胞基因组DNA中PCR扩增出NGF基因片段,先
克隆
至PUC-T
载体中
,经过酶切获得NGF片段后再定向插入原核表达载体PBV220,将构建的重组体PBV220-...
转基因动物的概念是什么?
答:
20世纪70年代末80年代初,人们用野生型Ri和Ti质粒转化烟草和马铃薯细胞获得再生植株后,以Ti质粒为
载体
的植物遗传转化技术随之被建立。近年来植物的遗传转化技术得到了迅速发展,建立了多种转化
系统
。按照基因引入受体植物细胞的方法,植物遗传转化技术大体可分为两类:以载体为媒介的基因转移和基因或DNA的直接转移。所谓以载...
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