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原核表达裂解缓冲液
DNA与蛋白质相互作用的研究方法有哪些
答:
为此,必须使用含有强界面活性剂的
缓冲液
,尽管它有可能影响一部分抗原抗体的结合。另一面,如用弱界面活性剂溶解细胞,就不能充分溶解细胞蛋白。即便溶解也产生与其它的蛋白结合的结果,抗原决定族被封闭,影响与抗体的结合,即使IP成功,也是很多蛋白与抗体共沉的悲惨结果。再次,为防止蛋白的分解,修饰,溶解抗原的缓冲液...
常用的重组DNA分子导入
原核
宿主细胞的方法有几种?
答:
deletion)、复制(duplication)或易位(translocation)等现象而使外源基因嵌入宿主的染色体内。【3】导入微生物受体细胞 感受态法:先用Ca离子处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境DNA分子的生理状态,这种细胞为感受态细胞,后将重组
表达
载体DNA分子溶于
缓冲液
中,在一定温度下促使感受态细胞吸收DNA分子 ...
DNA与蛋白质相互作用的研究方法有哪些
答:
GST 融合蛋白是在
原核表达
的,所以没有经过过多的象真核细胞内具有的蛋白修饰作用.所以另一种用来检验相互作用的蛋白也可以用原核表达出来,也就是所谓的重组蛋白.当 GST融合蛋白把重组蛋白沉淀下来,然后用重组蛋白的抗体作 Western blotting 检测.(2) GST 融合蛋白与体外 TNT 系统合成的多肽或蛋白的相互作用用来检验...
DNA与蛋白质相互作用的研究方法有哪些
答:
GST 融合蛋白是在
原核表达
的,所以没有经过过多的象真核细胞内具有的蛋白修饰作用.所以另一种用来检验相互作用的蛋白也可以用原核表达出来,也就是所谓的重组蛋白.当 GST融合蛋白把重组蛋白沉淀下来,然后用重组蛋白的抗体作 Western blotting 检测.(2) GST 融合蛋白与体外 TNT 系统合成的多肽或蛋白的相互作用用来检验...
PCR产物的检测方法有哪些
答:
上下槽中加入1×TBE电泳
缓冲液
,溢过加样孔,拔出梳子,排出加样孔中的气泡,将PCR产物或限制性内切酶消化产物2与1上样缓冲液混匀,用微量注射器加入加样孔底部,使样品在孔底成一层,两侧孔中加入标准分子量的DNA Marker。以2-10V/cm电压电泳,电泳时间足够长,使片断足以分开,待指示剂走到适宜...
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