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大肠杆菌表达载体构建
...将此重组质粒导入
大肠杆菌
,然后将大肠杆菌放在四种培养基中培养...
答:
质粒是基因工程最常用的运载体,质粒A上含有氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因,但目的基因与质粒A的结合位点位于四环素抗性基因上,因此
构建
基因
表达载体
时,目的基因(人的生长激素基因)的插入会破坏四环素抗性基因,但不会破坏氨苄青霉素的抗性基因.所以导入重组质粒的
大肠杆菌
能在无抗生素的培养基或含义...
高中生物选修3复习内容。
答:
(2)将cDNA前接上在
大肠杆菌
中可以适用的启动子,另外加上抗四环素的基因,
构建
成一个
表达载体
。(3)将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中,然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大肠杆菌中,大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉;如果培养基上长出大肠杆菌菌落,则表明β-珠蛋白基因已进入其中...
pET-his
载体
为什么必须在BL21(DE3)菌,而不能在DH5α中
表达
?
答:
BL21(DE3)菌株是在野生型BL21菌株的基础上,整合了一段来源于λ 噬菌体的DE3片段,该片段中包含了编码T7RNA聚合酶的基因,能够在IPTG或乳糖诱导下
表达
T7RNA聚合酶,而该聚合酶又能进一步转录T7启动子,从而启动
载体
上外源基因的表达。因此说,理论上只要整合了DE3片段的
大肠杆菌
(比如BL21(DE3)或JM...
基因工程中重组质粒怎么形成
答:
二、
大肠杆菌
质粒
载体
1.pBR322质粒质粒pBR322是经人工
构建
的一种较为理想的大肠杆菌质粒载体,亦是应用最为广泛的克隆载体,利用pBR322曾克隆到多种基因,虽然现在已有多种具有更优良特性的新型克隆载体逐渐代替了pBR322在基因克隆中地位,但pBR322仍是人工构建的具有几乎所有的理想特性的基因克隆载体之一。pBR322质粒...
如何使用基因工程的方法合成人胰岛素
答:
将人的胰岛素基因送到
大肠杆菌
细胞中,使得大肠杆菌自身可以合成胰岛素。科学家们把人的胰岛素基因送到大肠杆菌的细胞里,让胰岛素基因和大肠杆菌的遗传物质相结合。人的胰岛素基因在大肠杆菌的细胞里指挥着大肠杆菌生产出了人的胰岛素。随着大肠杆菌的繁殖,胰岛素基因也一代代的传了下去,后代的大肠杆菌也能...
说明
构建
文库时和作基因
表达
时应如何选择分子克隆
载体
和宿主菌细胞
答:
M13噬菌体是一种独特的
载体
系统,它只能侵袭具有F基因的
大肠杆菌
,但不裂解寄主菌.M13DNA(RF)在寄主菌内是双链环状分子,象质粒一样自主制复,制备方法同质粒.寄主菌可分泌含单链DNA的M13噬菌体,又能方便地制备单链DNA,用于DNA顺序分析、定点突变和核酸杂交.③拷斯(Cos)质粒:是一类带有噬菌体DNA粘性...
密码子为什么会影响
大肠杆菌
的增殖?
答:
B. 同步表达相关tRNA编码基因 2.载体的选择 所用表达载体必须是
大肠杆菌表达载体
,含有大肠杆菌RNA聚合酶所能识别的启动子(如PL、tac、T7等)和SD序列。(1)核糖体结合位点 外源基因在大肠杆菌细胞中的高效表达不仅取决于转录启动的频率,而且在很大程度上还与mRNA的翻译起始效率密切相关。大肠杆菌细胞...
生物:从基因文库中获取目的基因后做什么
答:
你好哦,你问的问题是关于“转基因的步骤”的,具体如下:1:目的基因的获取。有三种方法(1)从基因文库中获取(2)利用PCR技术扩增目的基因(3)人工合成 2:基因
表达载体
的
构建
。这个载体一般是质粒。3:将目的基因导入受体细胞。这个导入植物细胞一般用农
杆菌
转化法,也可用基因枪法或花粉管通道法。
基因工程的基本操作程序
答:
2、
载体构建
组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因。功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代;2、使目的基因能够
表达
和发挥作用。步骤:⑴用一定的限制酶切割质粒,使之出现一个黏性末端切口。⑵用同种限制酶切割目的基因,产生相同的黏性末端。⑶将目的基因片段插入质粒切口,...
利用基因工程生产胰岛素的过程如下图,据图回答:?
答:
解题思路:分析题图:图示表示利用基因工程生产胰岛素的过程,①表示基因
表达载体
的
构建
过程,该过程需要限制酶和DNA连接酶;②表示将目的基因导入受体细胞的过程;③表示目的基因在受体细胞中表达;④表示蛋白质的加工过程.(1)获取真核生物的目的基因一般选择从cDNA文库中获取.(2)将目的基因导入微生物...
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