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常用的蛋白表达系统有哪些
原核生物的
表达系统
和真核
的有
什么不同
答:
5、真核细胞在细胞周期中有专门的DNA复制期(S期);原核细胞则没有,其DNA复制常是连续进行的。6、真核细胞的有丝分裂是原核细胞所没有的。7、真核细胞有发达的微管
系统
,其鞭毛(纤毛)、中心粒、纺锤体等都与微管有关,原核生物则否。8、真核细胞有由肌动、肌球
蛋白
等构成的微纤维系统,...
可用
哪些
技术对细胞内某个
蛋白质
的水平进行干预
答:
3.蛋白质功能确定:如分析酶活性和确定酶底物,细胞因子的生物分析/配基-受体结合分析。可以利用基因敲除和反义技术分析基因表达产物-蛋白质的功能。另外对蛋白质表达出来后在细胞内的定位研究也在一定程度上有助于蛋白质功能的了解。Clontech的荧光
蛋白表达系统
就是研究蛋白质在细胞内定位的一个很好的工具...
双元
表达
载体
系统
的原理
答:
然后将带有35S promoter-expression gene-gfp的双元载体转化农杆菌,再通过农杆菌转染植物,最后可以通过农杆菌特有的ti-DNA转染机制,将双元载体的LB和RB之间的片段融合进宿主的基因组上。我以前用的是pCAMBIA3101+pUC-35S-GFP以及pZPZ211和pAA等 2.双元
表达
载体
系统
主要
包括
两个部分 3.一部分为辅助Ti...
外源基因在原核细胞中
表达
时
蛋白质
的存在形式
有哪些
?
答:
融合蛋白质会被切割释放,形成独立的外源蛋白质。这些不同形式
的蛋白
质存在方式取决于外源基因的表达方式和宿主细胞的特性。在原核细胞中,外源基因的表达通常使用载体(例如质粒)来转录和翻译。根据具体情况,可以选择适当的
表达系统
和标签等方法,以便有效地表达、纯化和检测外源蛋白质。
哺乳动物细胞
表达系统
优点缺点
有哪些
答:
哺乳动物细胞
表达系统
的优势在于能够指导
蛋白质
的正确折叠,提供复杂的N型糖基化和准确的O型糖基化等多种翻译后加工功能,因而表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面最接近于天然的高等生物蛋白质分子。缺点自然是成本高,制备周期比较长,生长条件复杂,对技术人员要求较高 ...
融合
蛋白
的融合蛋白简介
答:
融合蛋白 - 技术概况 融合蛋白技术是为获得大量标准融合蛋白而进行
的有
目的性的基因融合和
蛋白表达
方法。利用融合蛋白技术,可构建和
表达具有
多种功能的新型目的蛋白。 融合基因可在原核细胞(如大肠杆菌) 也可在真核细胞中进行表达。原核
表达系统
的特点是时程短,费用低,是科研中的主要工具。其缺点是真...
简述为什么酵母菌是外源真核基因最理想的
表达系统
答:
表达
的概念是产生了基因对应
的蛋白
质 A选项只是找到了基因,没有说明该基因已经表达 B、C项错误,理由同A 正确选项为D,酵母菌中植入人产生干扰素的基因,该基因表达后可产生干扰素蛋白,在酵母菌细胞中提取倒人干扰素蛋白说明干扰素基因在酵母菌细胞中表达。故正确答案选D。
大肠杆菌作为外源基因
表达系统有哪些
优缺点
答:
优势:全基因组测序,共有4405个开放型阅读框架 基因克隆
表达系统
成熟完善 繁殖迅速、培养简单、操作方便、遗传稳定 被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物 劣势:缺乏对真核生物
蛋白质
的复性功能 缺乏对真核生物蛋白质的修饰加工系统 内源性蛋白酶降解空间构象不正确的异源蛋白 细胞周质...
蛋白实验 |
蛋白质
双向电泳
答:
蛋白质
组是基因组或细胞/组织在特定生理、病理条件下
表达
的所有蛋白质的集合。为了鉴定和分离功能基因及其产物,需要高效、高分辨率、微量样品的分析鉴定技术。双向电泳和质谱联用已成为相关实验室的
常用
研究手段。随着功能基因组时代和蛋白质组时代的到来,双向电泳技术(Two-dimensional Electrophoresis)已成为...
.
常用的
重组DNA分子导入原核宿主细胞的方法有几种?并分析其优缺点。 比...
答:
一般就是电穿孔法或化学转化法,或者你用噬菌体也行。大肠杆菌系统是原核
表达系统
中比较成熟的一种。大肠杆菌的遗传背景和生理生化特性为人们所熟悉 ,宜于进行基因操作 ,生产技术简便 ,生产成本低廉 ,是目前使用广泛的表达体系。但是,由于大肠杆菌内不存在翻译后修饰等机制,所以大量表达的外源性
蛋白
通常...
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