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构建真核表达载体
请问什么是穿梭质粒
载体
和
表达
质粒载体?
答:
穿梭质粒是指可以在多种宿主下复制。比如说通常能够在哺乳动物,酵母或者其他细菌复制
表达
的质粒,同时可以在大肠杆菌内复制。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。表达质粒就是指带有启动子,增强子等等,使其在宿主体内不仅仅是可以复制,还能够通过转录翻印,在宿主内表达出相应蛋白的质粒 ...
基因工程中重组质粒怎么形成
答:
经过人工
构建
的
载体
,不但能与外源基因相连接,导入受体细胞,还能利用本身的调控系统,使外源基因在新细胞中复制以致功能的
表达
。目前,将外源基因运送到原
核
生物细胞的载体研究的较多,运送到植物和动物细胞中去的载体还处于探索阶段。本章以原核细胞载体为主,讨论各类载体的结构、功能以及构建过程。在基因工程中所用的...
扩增获得一个酶的编码基因后,应该如何进行序列分析和选择
表达载体
...
答:
序列测定可以交给测序公司做,又便宜又省事。
表达载体
选择原则:(1)
构建
的质粒克隆载体应该是能在转化的受体细胞中进行有效的复制,并且作为质粒克隆载体,希望在受体细胞中有较多的拷贝数。为此,构建的质粒克隆载体必须含有能在受体细胞内有效复制的质粒复制起始位点(ori),最好是松弛型质粒的复制起始...
真核
生物基因在原核生物里
表达
应如何操作
答:
通过基因工程手段,用特定的限制性内切酶,切割目的基因和质粒
载体
,然后用DNA连接酶连接,用氯化钙或者电刺激处理原
核
生物细胞,把带有目的基因的载体导入原核生物即可.
基因工程的克隆
载体
有哪些研究?
答:
以载体的用途分为通用克隆载体、大片段DNA克隆载体、cDNA克隆载体和表达克隆载体等等。克隆载体有的用于大肠杆菌、有的用于植物、有的用于动物。目前和今后一段时期内将会重点发展适用于
真核
生物的强
表达载体
和基因定位整合的克隆载体。
如何阅读分析质粒图谱
答:
因而可以在两种不同类群宿主中存活和复制的质粒载体。此概念不仅用于不同的微生物菌群之间,也可以推广到
真核
生物
表达载体
的
构建
,如用于枯草的pBE2、酵母的pPIC9K、哺乳动物表达载体pMT2 和用于植物细胞的Ti 质粒。这些穿梭质粒不仅可以在大肠杆菌中复制扩增,也可以在相应的枯草、酵母、动物或植物细胞中...
如何过
表达
long non-coding RNA?用哪些
载体
答:
通过载体实现lncRNA的过表达原则上将全长lncRNA定向克隆到
表达载体
上实现。可以选用载体有:1.可以修饰的启动子载体,一般如cmv; 2. pcDNA3.1 等。长链非编码RNA(Long non-coding RNA, lncRNA)是长度大于 200 个核苷酸的非编码 RNA。研究表明, lncRNA 在剂量补偿效应(Dosage compensationeffect)、...
...个基因的序列及其所属物种,如何通过试验方法获得该基因的
表达
...
答:
第二步 将编码序列克隆到表达载体上: 原核表达载体 或
真核表达载体
最好带标签的(例如his6,gst 目的为了检测和纯化)第三步 载体转化宿主,进行目的基因的表达。通过标签进行纯化 === 以上是通过基因工程技术外源表达的方法 如果想获得内源蛋白 如下 获得该蛋白的抗体(通过基因工程产物...
基因工程问题,
真核
基因在原核细胞中如何
表达
答:
一、请删去基因中的内含子。这可以通过将该基因的cDNA连接至载体中而解决。二、所用的表达载体中,你所需要表达的基因必须由宿主菌能够使用的原核启动子来启动。一般商业的原
核表达载体
均有这类启动子。三、如果你需要表达的基因与宿主菌的密码子偏好有很大的不同,则需要更改这些密码子一适应宿主菌。
真核表达
系统与原核表达系统的异同?
答:
一、
真核表达
系统与原核表达系统的共同点 1、真核与原核细胞结构基因均有调控序列。2、表达过程都具有复杂性,表现为多环节。3、表达的时空性,表现为不同发育阶段和不同组织器官上的表达的复杂性。二、真核表达系统与原核表达系统的的区别 1、细胞结构存在着差异 原核细胞细胞器只有核糖体,细胞核没...
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