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真核表达载体构建中遇到的问题
酵母双杂交系统简介
答:
酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system)源于对
真核
生物转录起始调控过程的深入理解。在这个系统中,基因转录的启动需要反式转录激活因子的介入,如酵母转录因子GAL4。GAL4的结构具有模块化特性,由DNA结合域(DNA-BD)和转录激活域(DNA-AD)两个独立的结构域组成,每个域在单独存在时仍具备功能,但...
高中生物为什么说
真核
细胞的基因因为内含
答:
原核细胞的基因结构,非编码区,外显子和内含子的区别是在原核细胞中外显子能被转录出来。 2,非编码区;特点.
构建表达载体
目的基因即编码蛋白质的基因:编码连续,结构简单,在
真核
细胞的编码区内含有外显子和内含子,即编码区;特点:编码区:编码区:间隔的真核细胞的基因结构 ...
攻略动物细胞转染,一把成为实验高手
答:
一、什么是转染?转染是将外源遗传物质如DNA、RNA、质粒等导入
真核
细胞的一种实验技术,广泛应用于研究基因
表达
对细胞生理水平的影响以及获得重组蛋白。随着分子生物学和细胞生物学的不断发展,转染已成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具,是实验室工作中最常涉及的基本方法。二、转染的类型 哺乳动物...
如何选择合适的
表达载体
答:
首先,你得先确定这个3.4kb的基因是需要在原核还是
真核表达
系统中表达;其次,选择好相对应的表达系统后,再考虑这段基因的表达产物(即蛋白)最后是否需要附加上标签(tag)以用于后续的分离纯化,以及这个标签是加在C末端还是N末端等。最后,根据你的实验目的确定你所需要的表达量,是采用一个含有强...
基因
表达载体中的
目的基因可不可以是CDNA文库的
答:
cDNA以mRNA为模板,基因组含有的基因在特定的组织细胞中只有一部分表达,而且处在不同环境条件、不同分化时期的细胞其基因
表达的
种类和强度也不尽相同,所以cDNA文库具有组织细胞特异性。cDNA文库显然比基因组DNA文库小得多,能够比较容易从中筛选克隆得到细胞特异表达的基因。但对
真核
细胞来说,从基因组DNA...
已知氨基酸序列怎么
构建
原核质粒
答:
所有的质粒都是在细菌(原核)中
构建
和扩增的,但要在真核细胞中表达需要
真核表达载体
,要在原核细胞中表达需要原核表达载体.这两种载体主要的区别是启动子和polyA加尾信号的不同,一个适合在原核细胞中表达,一个适合在真核细胞中表达. 你需要哪种质粒取决于你最终需要在哪种细胞中表达目的蛋白,如果你要...
什么是蛋白质
表达
系统
答:
大肠杆菌表达系统优点在于遗传背景清楚、繁殖快、成本低、表达量高、表达产物容易纯化、稳定性好、抗污染能力强以及适用范围广等。 编辑本段酵母表达系统 酵母表达系统作为一种后起的外源蛋白表达系统,由于兼具原核以及
真核表达
系统的优点,正在基因工程领域中得到日益广泛的应用,应用此系统可高水平表达蛋白,且具有翻译后...
请教一个生物
问题
如果把原核生物的基因导入
真核
生物的细胞中,那么该基...
答:
我来说一下:如果这段原核的基因是装在
表达载体
上(如质粒),然后通过转染进入哺乳动物细胞,那么不一定会被切割.至少我成功过(用e.coli的两个基因转到HEK293细胞,用western检测没
问题
).如果这段基因是直接通过inject到
真核
细胞,首先被转录成mRNA的几率很低,而且很容易被切割.我说的都是大概率事件,...
甲型H1N1流感的病原体与大肠杆菌相比没有什么结构?主要由什么外壳和什...
答:
构建
猪流感病毒亚单位基因工程疫苗的方法有多种,其中报道较多的包括: 1)利用原核表达系统(大肠杆菌系统)或
真核表达
系统(酵母系统)在体外表达猪流感病毒流行毒株的HA基因和NA基因,然后收获、浓缩和纯化目的蛋白,再进一步制苗免疫。这种方法的优点是制备过程简单、目的蛋白产量大、主要成分可以定量配置。但由于体外表达的...
怎么鉴别外源基因和内源基因的
表达
答:
回复:我也在用His单抗做western blot,恰恰也
遇到
这个问题,共同探讨 转染前首先应该明确你的目的基因在细胞中的表达情况,从你的提法看应该是有基础表达的 1)首先是转入基因能否表达
的问题
。
真核表达载体
的病毒启动子一般较核内基因组启动子高效,所以瞬转的质粒转录水平一般会高出基因组不少(从瞬转...
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