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蛋白分离纯化的整个流程是什么
如何从发酵液中
分离纯化蛋白质
答:
粗提取——硫酸铵分级沉淀——透析脱盐——乙醇分级沉淀——离子交换层析
我问师兄如何让
蛋白
纯度更高,他只告诉我这点……
答:
用His-tag 做
蛋白纯化
时,或多或少有这样的经历:要么蛋白纯度低、纯化出来的蛋白失去原有结构,要么功能受到影响、难以从哺乳类细胞表达系统中纯化出目标蛋白。 作为一个孜孜不倦积极进取的人,我觉得在实验之前得先多做做功课,于是跑到隔壁实验室向师兄请教。师兄跟我说 Strep-tag 系统具有
纯化过程
温和,目标蛋白纯度...
简述血红
蛋白的
提纯
过程
答:
加速细胞破裂(相似相溶原理)加蒸馏水,再加甲苯,磁力搅拌器充分搅拌无明显现象③分离血红蛋白溶液初步得到血红蛋白溶液通过离心将密度不同的物质分离离心(较高速)试管溶液分为4层④透析去掉液体中的小分子物质小分子物质容易透出透析袋透析(12小时)透析袋中物质的颜色更红 1.2
分离纯化蛋白质的
...
...我的用的无血清培养基,带His标签,问下
怎么纯化
,感谢
答:
用镍柱镍柱
分离纯化
固定金属离子亲和柱主要用于金属螯化离子。位于许多蛋白中的组氨酸残基将会和许多金属离子,例如锌。铜,镍,铁等形成复合物。因此,该柱料能选择性螯合一些具有组氨酸残基的
蛋白质
。但是半胱氨酸和咯氨酸残基也能和固定化金属螯和。但是亲和力比组氨酸要弱。所以,结合的强度是和缓冲液...
纯化蛋白的
原理
是什么
?
答:
原理是:与水互溶的有机溶剂(如甲醇、乙醇)能使一些蛋白质在水中的溶解度显著降低;而且在一定温度、pH值和离子强度下,引起蛋白质沉淀的有机溶剂的浓度不同,因此,控制有机溶剂的浓度可以
分离纯化蛋白质
。例如,在冰浴中磁力搅拌下,在4℃预冷的培养液中缓慢加入乙醇(-25℃),可以使冰核蛋白析出...
什么
是生物
分离
?与化学分离相比有何特点?
答:
分类: 教育/科学 >> 科学技术 >> 工程技术科学 问题描述:与化学分离相比有何特点?解析:生物
分离的
基本概念 生物
分离是
从生物材料、微生物的发酵液、生物反应液或动植物细胞的培养液中分离并
纯化
有关产品(如具有药理活性作用的
蛋白质
等)
的过程
,又称为下游加工过程。生物
分离过程的
主要特点 n 常无...
如果你进行两种
蛋白质的分离纯化
,你觉得在实验前你要做哪些准备工作...
答:
进行两种
蛋白质的分离
钝化,在实验前要做好准备工作。
...关于
蛋白质的
,初步纯化与高度
纯化分离的
效果有何不同?
答:
纯度要求不一样,初步提纯只是去除一些在分析图谱很容易分开的杂志,而高度
纯化
则要
分离
去一些较难
分离
开的杂志,以使
蛋白质
纯度提高到某些要求的高度
请问有没有孙彦所编的《生物
分离
工程》的课后习题解答或者是分析之类...
答:
展开
全部
第一章 绪论 P8思考题:1、5、6 1、 生物分离工程:是指从发酵液、酶反应液或动植物细胞培养液中分离、纯化生物产品
的过程
。P1 2、 生物
分离纯化过程
的一般
流程
可分为几大部分?分别包括哪些单元操作?P4 答:一、发酵液的预处理(固液分离):单元操作:过滤和离心; 二、产物的提取(初纯化):单元操作:...
如何减少
蛋白质分离纯化
中减少蛋白质变性的机会
答:
在
分离纯化
时,先要了解你
蛋白质的
性质,比如等电点 然后选择合适的PH(比如说IgG MAB 洗脱时适合ph为4-4.5),合适的盐离子浓度,合适的缓冲体系。另外你可以适当添加一些其他物质减少变性机会,比如山梨醇,蔗糖等。一般如果说是过柱子的,那就推荐PH为3-5,盐离子浓度为0.1-0.5M,流速为0.3ml...
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