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蛋白质体外表达
急求分子生物学是如何发展的~?
答:
随后陆续发现生命的许多基本现象(物质代谢、能量代谢、消化、呼吸、运动等)都与酶和
蛋白质
相联系,可以用提纯的酶或蛋白质在
体外
实验中重复出来.在此期间对蛋白质结构的认识也有较大的进步.1902年EmilFisher证明蛋白质结构是多肽;40年代末,Sanger创立二硝基氟苯(DNFB)法、Edman发展异硫氰酸苯酯法分析肽链N端氨基酸;...
利用
蛋白质
工程为什么不可以在大肠杆菌中获得人的胰岛素
答:
如楼上所说,在人体内,胰岛素只有一条原基因,原基因上含有一段C肽,而C肽是在后期要被切除掉的,形成以二硫键相连接的AB链复合体。大肠杆菌不能直接在细胞内切除C肽,因此不能直接获取胰岛素。目前用大肠杆菌获取胰岛素有以下2种方法:第一种是AB基因分别
表达
和
体外
复性,第二种是原基因表达后体外...
核糖体展示技术的操作步骤
答:
③ PCR产物再进行延伸PCR,引物6含有T7启动子序列和5′端茎环结构序列,下游产物同前。最后得到的PCR产物,5′端接上T7启动子和茎环结构以及SD序列,3′端则融合了间隔序列并含有3′端的茎环结构 1)
体外表达
可以利用来自原核的E.coliS30无细胞
蛋白质
合成系统,或真核的兔网织红细胞裂解液和麦胚提取...
EGFP、mcherry、FLUC标记
蛋白
有什么区别
答:
eGFP是增强型绿色荧光蛋白(),mCherry是单体红色荧光蛋白,FLUC是萤火虫荧光素酶。蛋白标签(proteintag)是指利用DNA
体外
重组技术,与目的蛋白一起融合
表达
的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化。理论上说蛋白标签越大,对
蛋白质
本身的功能影响越大,所以大分子标签一般只用于检测或...
关于编码区和非编码区。
答:
非编码区对基因的
表达
主要起调控作用,如启动子等 真核生物基因的编码区是不连续的,分为外显子和内含子(其中外显子是可以最终实现表达(表现在
蛋白质
的一级结构上),内含子则最终不能表达(所以真核生物基因表达过程中,转录产物——信使RNA不能直接进行翻译,而是要修剪掉内含子部分后才能去指导...
什么是rnarna有哪些用处
答:
反义RNA(antisenseRNA),它参与基因
表达
的调控。 上述各种RNA分子均为转录的产物,mRNA最后翻译为
蛋白质
,而rRNA、tRNA及snRNA等并不携带翻译为蛋白质的信息,其终产物就是RNA。 核酶 另外还有一种特别的RNA(其分类与上述RNA分类无关)——核酶 核酶(ribozyme)一词用于描述具有催化活性的RNA, 即化学本质是核糖核酸(RNA...
某细胞可组成性地分泌一种
蛋白质
,已经知道了它的N端部分氨基酸序列,如何...
答:
20核苷酸长,它们能和mRNA的部分序列形成互补碱基对;(3)提取细胞总mRNA;(4)将合成的短的DNA片段与细胞总的mRNA杂交,可分离出所需要的mRNA;(5)将此mRNA进行
体外
翻译以验证是否为目的基因;(5)将该mRNA进行反转录获得cDNA;(6)将此cDNA连接到一
表达
载体上;(7)将此表达载体在适当的细胞中表达。
常见的融合
蛋白表达
标签有哪些呢?
答:
这个分子量为33KDa的单体蛋白能融合在重组蛋白的N端或C 端,并在原核和真核系统中
表达
。HaloTag配基是小分子化学物,能够在
体外
或体内与HaloTag蛋白共价结合。 SNAP Tag 是新一代的蛋白标签技术,不仅专一性极高而且稳定,最大的优点是适用于多种环境下的
蛋白质
检测与纯化,如活细胞内、溶液中、或固态相(如SDS-...
真核生物可能在哪些水平上实现对基因的
表达
调控
答:
这些序列的重排可以形成新的基因,也可以调节基因的
表达
。这种重排是由基因组中特定的遗传信息决定的,重排后的基因序列转录成mRNA,翻译成
蛋白质
。 尽管基因组中的DNA序列重排并不是一种普通方式,但它是有些基因调控的重要机制,在真核生物细胞生长发育中起关键作用。 ⑴酵母交配型转换。 啤酒酵母交配型转换是DNA重排...
什么是基因重组
蛋白
?
答:
重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份拷贝紧密相连,发生联会。这个结构称为二阶体,二阶体的每条染色体单元称为染色单体,染色体物质的两两交换就发生在不一样的染色单体。基因重组
蛋白
是利用基因DNA重组或者rna重组过程当中获得的蛋白。
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