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融合蛋白表达系统
苍蝇的抗菌肽可不可以用在人的身上
答:
目前,已进入临床应用的基因工程药物多数是采用原核
表达系统
生产的,但由于抗菌肽对细菌的杀伤作用,不能用原核表达系统直接表达具有生物活性的抗菌肽,而如果采用
融合蛋白
的形式表达,将给表达产物的后处理带来很大麻烦。因此,国内外的研究者多采用真核表达系统进行抗菌肽基因工程研究。 近年来,以酵母为基因工程受体菌的研究...
免疫共沉淀和GST pull down技术各有何优势?
答:
四、GST pull-down实验是一个行之有效的验证酵母双杂交
系统
的体外试验技术,近年来越来越受到广大学者的青睐。其基本原理是将靶蛋白-GST(Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巯基转移酶)
融合蛋白
亲和固化在谷胱甘肽亲和树脂上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”。五、目的蛋白溶液过柱,可从中...
DAP-seq(DNA亲和纯化测序)技术常见问题(input是什么)
答:
1. DAP-seq原理、技术流程,能解决什么样的问题?原理:体外表达的蛋白和DNA进行亲和纯化,将与蛋白结合的DNA洗脱后进行高通量测序。技术流程:将编码转录因子的CDS序列构建到含有亲和标签的载体中,构建
蛋白表达
载体,进行体外蛋白表达,形成转录因子和亲和标签的
融合蛋白
;提取样品的基因组DNA,构建DNA文库,...
启动子有哪三个碱基
答:
原核
表达系统
中通常使用的可调控的启动子 有Lac(乳糖启动子)、Trp(色氨酸 启动子)、Tac(乳糖和色氨酸的杂合启动子) 、lPL (l噬菌体 的左向启动子)、T7噬菌体启动子等。(1)Lac启动子:它来自大肠杆菌 的乳糖操纵子 ,是DNA分子 上一段有方向的核苷酸序列,由阻遏
蛋白
基因(LacI)、启动基因(P)、操纵基因(O)...
生物技术五大工程:基因工程、细胞工程、
蛋白质
工程、酶工程、发酵工程...
答:
这五大工程互相联系、相互渗透, 构成了一个不可分割的整体。作为生物技术核心内容的基因工程 和细胞工程为发酵工程的菌种选育、酶工程与
蛋白质
工程中酶
蛋 白
的改造等领域提供技术支持;而发酵工程则为基因工程、细胞工程、酶工程和蛋白工程等领域的高科技成果实现产业化关键。这五大工程基本原理和方法建立...
蛋白质
工程的核心技术是什么
答:
蛋白质融合
将编码一种蛋白质的部分基因移植到另一种蛋白质基因上或将不同蛋白质基因的片段组合在一起,经基因克隆和
表达
,产生出新的
融合蛋白
质。这种方法可以将不同蛋白质的特性集中在一种蛋白质上,显著地改变蛋白质的特性。现在研究的较多的所谓“嵌合抗体”和“人缘化抗体”等,就是采用的这种方法...
蛋白
标签在现代生命科学中主要有哪些用途
答:
目前重组
表达
的蛋白主要加的标签有GST和His标签便于分离纯化。如pGEX载体
系统
含有谷胱甘肽转移酶(GST)基因,可将外源基因插入其中,使其表达产物带有GST的
融合蛋白
。利用GST-Agarose亲和层析柱对表达的蛋白进行分离纯化。如果需要时,可用凝血酶或Xa因子将目的蛋白从融合蛋白上切下来。pET-28a等载体上含有6个...
tdp-43到底是dna结合
蛋白
还是rna结合蛋白
答:
tdp-43到底是dna结合蛋白还是rna结合蛋白 研究RNA与蛋白的相互作用一般用三杂交系技术。三杂交
系统
的基本原理是将一个已知的RNA结合蛋白与转录因子的DNA结合domain构建第一个
融合蛋白
,第二种蛋白(待选的RNA结合蛋白)与转录激活结构域构建融合蛋白。此外构建和
表达
一杂合RNA,含有二个不同的结合位点。当RNA...
木霉
表达系统
答:
荧光观察结合Western blot的结果表明,在平台期中期和后期,带有GPI信号的GFP
融合蛋白
定位于细胞壁。这说明烟曲霉来源的GPI信号可被T.reesei识别,从而用于介导外源蛋白在T.reesei细胞壁中的定位
表达
。 随着蛋白质组的发展,研究者开始利用融合蛋白标签,可以获得高纯度和形态结构明确的重组蛋白。融合蛋白上的蛋白质标签与包被...
蛋白质
工程研究包括哪些内容?
答:
(1)基因水平上的蛋白质改造。这是从根本上实现的蛋白质改造,也就是第二代基因工程。它不再是单纯的基因克隆和表达,而要求进一步的基因操作。基因融合得到的融合基因,可表达得到
融合蛋白
质,从而改变了蛋白质的结构和功能,或者改变了蛋白质合成的调节机理,从而克隆到已建立的
表达系统
中;定位诱变在...
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