如题所述
在GST洗脱液中含有GSH的原因:在肝脏中参与生物转化第二相反应的一种生物酶。
GSH是还原型谷胱甘肽,配制成溶液后会被空气的中的氧逐渐氧化掉,即使盖上盖子过夜放置也会有部分被氧化掉的。这样会造成溶液浓度偏低对实验结果可能会有影响(比如作为GST洗脱液的时候结合的蛋白洗脱不完全)。所以GSH一定是要新鲜配制,现配现用。
基本原理
是将靶蛋白-GST(Glutathione-S-transferase谷胱苷肽巯基转移酶)融合蛋白亲和固化在谷胱甘肽标记的磁珠上,作为与目的蛋白亲和的支撑物,充当一种“诱饵蛋白”,目的蛋白溶液与之孵育,可从中捕获与之相互作用的“捕获蛋白”(目的蛋白)。
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