如题所述
第1个回答 2012-03-31
。。。
你这问题问的,都够写一套丛书了。。。追问
你这问题问的,都够写一套丛书了。。。追问
恩,我知道内容很多,如果知道的话简单给我说下。谢谢
追答原核表达载体下,首先得确认表达系统。
原核表达载体不是只有大肠杆菌一种宿主菌,尽管其最常用。比如乳酸菌、还有一些杆菌都可用于表达,也有相应的表达载体。现在只说大肠杆菌。
首先对于大肠杆菌内的表达载体,首先以启动子做些区分。比如常见的T7启动子,Trc 启动子,等等等等。2、相同的启动子类下,又可以根据其诱导表达条件下进行区分,比如IPTG诱导表达,温度诱导表达,阿拉伯糖诱导表达等等等等。3、表达是否可以关闭?又可以作为区分标准。4、表达出的产物的定位如何、溶解度如何?5、表达产物的用途如何?是进行功能活性鉴定筛选,还是大量制备?6、表达产物如何进行分离、是用什么样的融合标签?…………然后根据自己的需要来找需要的载体。不过,大多数时候pET、pGEX、pMal、pBV220、pQE系列载体已经够满足常规需要了。可以从中找到需要的。
真核表达载体更复杂。
首先还是得确认表达系统,比如哺乳动物细胞、还是植物细胞,还是昆虫,亦或是酵母等等?
载体类型是什么,常规的表达载体,还是病毒载体,还是些别的?就算是哺乳动物细胞,是用于建立稳定细胞系还是为了进行瞬时表达?还有就像原核里的一大堆条件……
所以根本说不清楚的。