如题所述
斜面培养基的制作过程分为几个步骤:
首先,准备溶液。在容器中加入部分水,根据配方称取所需的原料,如蛋白胨和肉膏,需要加热溶解。注意,溶解过程中蒸发的水分应在所有原料溶解后补足。若制作固体培养基,需将液体培养基煮沸,然后加入已称量的琼脂,直至完全融化并不断搅拌。
接着,调节pH值。使用pH试纸或设备测试培养基的酸碱度,如不符合要求,可以使用10%的HCl或NaOH进行调整,直至达到配方指定的pH值。
接下来,过滤培养基。使用滤纸、纱布或棉花趁热过滤,纱布可折叠成六层,滤纸则形成瓦棱形。分装过程中,分装于试管的是斜面培养基,分装于锥形瓶的是平板或液体培养基,确保培养基不粘附管口或瓶口。
装填完成后,用棉塞堵住管口或瓶口,棉塞应紧贴内壁以防止微生物侵入。制作斜面培养基时,每15×150毫米试管装3-4毫升,20×220毫米的装12-15毫升。棉塞制作后,塞入试管或锥形瓶,塞好后用纸和绳子捆扎以备灭菌。
制作斜面和平板培养基时,趁培养基未凝固时操作。斜面培养基制作时,将试管斜置在木条上;平板培养基则需要在酒精灯上灼烧瓶口,倒入培养皿后待凝固并倒置在恒温箱中。
另一种制作斜面的方法更为简便,将试管和胶合板组合,进行高压灭菌后,冷却后直接摆成斜面,不仅节省空间,还便于保温和水分控制。保存斜面时,可以使用聚丙烯塑料袋包裹试管以保持水分。
首先,准备溶液。在容器中加入部分水,根据配方称取所需的原料,如蛋白胨和肉膏,需要加热溶解。注意,溶解过程中蒸发的水分应在所有原料溶解后补足。若制作固体培养基,需将液体培养基煮沸,然后加入已称量的琼脂,直至完全融化并不断搅拌。
接着,调节pH值。使用pH试纸或设备测试培养基的酸碱度,如不符合要求,可以使用10%的HCl或NaOH进行调整,直至达到配方指定的pH值。
接下来,过滤培养基。使用滤纸、纱布或棉花趁热过滤,纱布可折叠成六层,滤纸则形成瓦棱形。分装过程中,分装于试管的是斜面培养基,分装于锥形瓶的是平板或液体培养基,确保培养基不粘附管口或瓶口。
装填完成后,用棉塞堵住管口或瓶口,棉塞应紧贴内壁以防止微生物侵入。制作斜面培养基时,每15×150毫米试管装3-4毫升,20×220毫米的装12-15毫升。棉塞制作后,塞入试管或锥形瓶,塞好后用纸和绳子捆扎以备灭菌。
制作斜面和平板培养基时,趁培养基未凝固时操作。斜面培养基制作时,将试管斜置在木条上;平板培养基则需要在酒精灯上灼烧瓶口,倒入培养皿后待凝固并倒置在恒温箱中。
另一种制作斜面的方法更为简便,将试管和胶合板组合,进行高压灭菌后,冷却后直接摆成斜面,不仅节省空间,还便于保温和水分控制。保存斜面时,可以使用聚丙烯塑料袋包裹试管以保持水分。
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