我想知道凝胶过滤色谱、离子交换色谱、亲和色谱、疏水色谱，这四种色谱相比，它们各自的优缺点，还有各自适合分离纯化什么蛋白？答得好追加分数！
四种色谱相比较的话，就看你是纯化什么性质的蛋白质，根据蛋白质与杂质之间的的性质来决定选择哪种层析技术。
凝胶：上样量为柱体积的0.5-1%，不要超过2%，是物理方法，填料无吸附作用。要杂质与蛋白质分子量相差较大时才能有效分开。
离子交换：通过蛋白的所带电荷不同来纯化的，参考等电点来控制buffer的pH，洗脱过程是低浓度到高浓度，也就是说离子强度增加，蛋白电荷小的就先被洗脱下来。
亲和：是特异性吸附，使蛋白带上标签，能结合到填料位点上，通过争夺结合位点来洗脱。
疏水：是从高盐至低盐，是看蛋白质与杂志的疏水性来洗脱。
四大层析方法各有优缺点，但是只要能纯化出目标蛋白就是好的纯化方法！
建议你看下《蛋白质纯化手册》！
凝胶：上样量为柱体积的0.5-1%，不要超过2%，是物理方法，填料无吸附作用。要杂质与蛋白质分子量相差较大时才能有效分开。
离子交换：通过蛋白的所带电荷不同来纯化的，参考等电点来控制buffer的pH，洗脱过程是低浓度到高浓度，也就是说离子强度增加，蛋白电荷小的就先被洗脱下来。
亲和：是特异性吸附，使蛋白带上标签，能结合到填料位点上，通过争夺结合位点来洗脱。
疏水：是从高盐至低盐，是看蛋白质与杂志的疏水性来洗脱。
四大层析方法各有优缺点，但是只要能纯化出目标蛋白就是好的纯化方法！
建议你看下《蛋白质纯化手册》！
温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考
第1个回答 2012-08-03
凝胶过滤色谱法： 分辨率较高，但是上样量仅为柱体积的1%，而且对流速也有严格的限制
离子交换色谱法：根据目的蛋白质表面所含有的氨基酸残基带有的净电荷分离蛋白质，但是分辨率没有凝胶过滤高
亲和层析法： 根据生物分子的特异性分离目的蛋白，特异性很高，但是配件容易丢失 适合含有特异性的标签的或者抗体
疏水色谱：根据疏水性来分离蛋白质，缺点是有的蛋白质在高盐中溶解度降低，所以应用范围受到限制，适合蛋白质表面含有较多疏水性氨基酸残基的疏水性蛋白质本回答被提问者采纳
离子交换色谱法：根据目的蛋白质表面所含有的氨基酸残基带有的净电荷分离蛋白质，但是分辨率没有凝胶过滤高
亲和层析法： 根据生物分子的特异性分离目的蛋白，特异性很高，但是配件容易丢失 适合含有特异性的标签的或者抗体
疏水色谱：根据疏水性来分离蛋白质，缺点是有的蛋白质在高盐中溶解度降低，所以应用范围受到限制，适合蛋白质表面含有较多疏水性氨基酸残基的疏水性蛋白质本回答被提问者采纳
