在纯化蛋白时,镍离子有什么作用?

用His柱纯化的

镍柱纯化his-tag protein是常用的方法。原理大概就是his上有咪唑杂环,这个环可以带有很多电子,可以与含正电的金属离子发生亲和反应。由于蛋白质是两性的,所以当pH变化时,带电也会发生变化,所以可以控制pH进行亲和/洗脱,从而纯化目的蛋白。
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