如题所述
基本步骤:
目的基因的扩增、载体与目的基因双酶切、电泳、割胶回收、目的基因与载体的连接反应、重组体筛选、验证重组体、转化入大肠杆菌进行表达。
问题在于:目的基因如何获取,扩增策略的决定,表达载体的选择,双酶切选择哪一对限制性内切酶,如何筛选重组体等等。
目的基因的扩增、载体与目的基因双酶切、电泳、割胶回收、目的基因与载体的连接反应、重组体筛选、验证重组体、转化入大肠杆菌进行表达。
问题在于:目的基因如何获取,扩增策略的决定,表达载体的选择,双酶切选择哪一对限制性内切酶,如何筛选重组体等等。
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