将某一基因进行重组表达,纯化重组蛋白制备抗体

将某一基因进行重组表达,纯化重组蛋白制备抗体,用 Westen bIOt来 检测某一组织中该蛋白的
表达水平,出乎意料的是除了预计的蛋白条带外,还分别发现了分子量大于和小于预期分子量的
蛋白条带,请解释原因。

第1个回答  2011-07-20
不知您做的是单抗还是多抗?百替生物认为,您的情况可能是由于抗体在细胞内的非特异性反应。另外,如果蛋白条带靠的非常紧,呈双带形式,那么很有可能您的蛋白产生了磷酸化的现象。如果分子量较大的蛋白的蛋白质量正好是预计蛋白的倍数的话,则应考虑该蛋白在体内是否存在比较难打开的单聚或者多聚形态。
百替生物可以为您提供特异性更高的蛋白抗体,来公司网站逛逛吧!追问

磷酸化是什么引起的啊?不会导致分子量小的蛋白吧!

追答

磷酸化是蛋白分子在细胞内的一种翻译后修饰。当细胞受到某种信号刺激时,处于该条信号通路上的蛋白可能会产生磷酸化,成为活性形式。当然,也有的蛋白本身在细胞内就以磷酸化的形式存在。
磷酸化的蛋白不会导致蛋白分子量变小。如果您的分子量较小的蛋白上有比较明显的拖带,那么则应考虑蛋白的泛素化修饰。

追问

泛素话修饰?
谢谢你哦!

本回答被提问者采纳

相关了解……

你可能感兴趣的内容

本站内容来自于网友发表,不代表本站立场,仅表示其个人看法,不对其真实性、正确性、有效性作任何的担保
相关事宜请发邮件给我们
© 非常风气网