跑PCR后，琼脂糖电泳后显现不出来条带，阳性对照也没有条带，只有maker，跪求解答

MgSO4和KOD-plus呢？我们这边的体系是33.5ul水，5ul10xKOD-plus Buffer，5ul dNTP，2ulMgSO4，2ul模版，1.5ul引物，1ulKOD-plus追问

我们的buffer里面含有MgSO4，酶是rTaq 0.5ul

追答

有各种试剂的浓度么？
一般体系是这样的。如果是市面上通用的模板和聚合酶的话按照你这么加应该没问题。不过模板有不同细胞系的，有些能P出来，有些不行，我用过的模板大概就有5，6种了。不过阳性对照出不来的确有点奇怪，应该来说阳性对照是已经成熟并且确认体系和适宜浓度的。
10×扩增缓冲液 5ul
4种dNTP混合物 4-5ul
引物 各10～50pmol
模板DNA 0.1～1ug
Taq DNA聚合酶 1.25u
加三蒸水至 50ul

追问

谢谢你的耐心解答，今天上午又跑了一遍，结果阳性对照没有带，其余的都有带呢，崩溃了

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