如何用绿色荧光蛋白标记细菌

如题所述

好专业问题,我看了些资料。将30只SD大鼠随机分为三组:空白对照组、对照组和甲氨蝶呤(MTX)组,每组10只。给对照组和MTX组大鼠灌饲GFP标记的大肠杆菌TG1对移位的细菌进行示踪,MTX组大鼠皮下注射MTX制作大鼠化疗模型。使用荧光显微镜及质粒酶切电泳鉴定内脏分离出的细菌是否来源于肠道。结果:在应用MTX大鼠的肠系膜淋巴结、肝、脾和肾,均可分离出GFP标记E.coliTG1。结论:MTX能引起细菌移位,在细菌移位的动物实验研究中,GFP示踪技术是一种简单、可靠和有效的方法。
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第1个回答  2013-10-27
绿色荧光蛋白(green fluorescent protein),简称GFP,这种蛋白质最早是由下村修等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现。其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光。这个发光的过程中还需要冷光蛋白质Aequorin的帮助,且这个冷光蛋白质与钙离子(Ca2+)可产生交互作用。
  由水母Aequorea victoria中发现的野生型绿色萤光蛋白,395nm和475nm分别是最大和次大的激发波长,它的发射波长的峰点是在509nm,在可见光绿光的范围下是较弱的位置。由海肾(sea pansy)所得的绿色萤光蛋白,仅有在498nm有一个较高的激发峰点。
  在细胞生物学与分子生物学领域中,绿色萤光蛋白基因常被用作为一个报导基因(reporter gene)。一些经修饰过的型式可作为生物探针,绿色萤光蛋白基因也可以克隆到脊椎动物(例如:兔子上进行表现,并拿来映证某种假设的实验方法。
具体操作过程

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