蛋白质表达系统的选择原则

如题所述

选择蛋白质表达系统有以下几个原则:

1. 蛋白质类型:应选择适合表达目标蛋白质的表达系统,例如,对于带有复杂的翻译后修饰的蛋白质,如糖蛋白、激素和抗体等,应选择哺乳动物细胞或昆虫细胞表达系统;对于较简单的蛋白质,如酶类和结构蛋白等,则可以选择细菌或酵母表达系统。

2. 表达量:应根据需要确定表达的量,选择适当的表达系统。例如,对于大规模的蛋白质表达,可以选择哺乳动物细胞或昆虫细胞表达系统;对于小规模的实验,可以选择细菌表达系统。

3. 成本:应根据实验经费和实验规模等因素选择适当的表达系统。例如,细菌表达系统成本相对较低,适合进行大规模生产;哺乳动物细胞表达系统成本相对较高,适合进行小规模实验,但可以高效地表达复杂蛋白质。

4. 可扩展性:应选择易于扩展的蛋白质表达系统,以确保在需要大规模表达蛋白质时能够快速扩展。例如,细菌表达系统易于扩展,可以满足大规模表达的要求。

5. 稳定性:应选择稳定性较好的表达系统,以确保蛋白质表达时的相对稳定性和高纯度性。例如,哺乳动物细胞表达系统具有较好的抗冻解能力和适应性,适合表达复杂的蛋白质。
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第1个回答  2023-06-07
蛋白质表达系统的选择原则是要根据所需要表达的蛋白质的性质和用途来选择。一般来说,常用的蛋白质表达系统有细菌表达系统、酵母表达系统、哺乳动物细胞表达系统、昆虫细胞表达系统等。
选择表达系统的原则是要考虑到表达蛋白质的效率、纯度、活性以及成本等因素。对于一些小分子量的蛋白质,如肽类、抗体Fab片段等,可以选择细菌表达系统,因为细菌表达系统的表达效率高,成本低,适合大规模生产。但对于大分子量的蛋白质,如重组蛋白、膜蛋白等,则需要选择哺乳动物细胞表达系统,因为哺乳动物细胞能够正确地折叠和修饰蛋白质,保证蛋白质的生物活性和稳定性。此外,酵母表达系统适用于一些需要进行重复糖基化修饰的蛋白质,而昆虫细胞表达系统则适用于一些需要进行复杂的糖基化修饰的蛋白质。
在实际操作中,还需要考虑到表达载体的选择、宿主菌株的选择以及表达条件等因素。比如,对于一些需要进行复杂的糖基化修饰的蛋白质,需要选择含有相应糖基转移酶基因的宿主菌株,如CHO细胞;而对于一些需要进行高水平表达的蛋白质,则需要选择高效的表达载体和表达条件。
总之,选择蛋白质表达系统需要根据所需要表达的蛋白质的性质和用途来选择,同时还需要考虑到表达效率、纯度、活性、成本等因素,以及表达载体、宿主菌株和表达条件等因素的影响。

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