免疫印迹与elisa和western blot有什么区别,似乎原理差别不大,谁能细致说说

如题所述

酶联免疫吸附实验(ELISA) ,蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot,二者在原理上、应用上有区别,具体如下:

1、原理不同

蛋白质印迹法,其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。

ELISA方法的基本原理是酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合,此种结合不会改变抗体的免疫学特性,也不影响酶的生物学活性。此种酶标记抗体可与吸附在固相载体上的抗原或抗体发生特异性结合。

滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型,出现颜色反应。

2、应用不同

蛋白免疫印迹(Western Blot),将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。

用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。如今应用较多的有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP应用最广。

3、提出者不同

蛋白质印迹法是由瑞士米歇尔弗雷德里希生物研究所(Friedrich Miescher Institute)的Harry Towbin在1979年提出的。在尼尔·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化学》中首次被称为Western Blot。

Engvall和Perlman建立酶联免疫吸附实验。

参考资料来源:百度百科-蛋白质印迹法

参考资料来源:百度百科-elisa

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第1个回答  推荐于2017-09-16
酶联免疫吸附实验(ELISA) ,蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot
都是抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。
原理都是靠免疫学的抗原抗体结合,二抗上带酶,通过与底色反应显色。区别的话WB所检测的一般是抗原,而Elisa抗原抗体都可以检测。WB只能用抗体去检测你的蛋白样品。ELISA可以固定抗原也可以固定抗体。WB所检测的抗原可以知道其分子量的大小,或是否是多聚体、降解产物等,一句话,WB可以确定所用抗体是与那种蛋白起作用的;而Elisa无能为力,一锅端了。本回答被提问者和网友采纳

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