如题所述
tet-off/tet-on系统是一种利用原核调控元件在真核细胞中定量并特异地控制外源基因表达的体系,它是用大肠杆菌tn10转座子中四环素操纵子原理来实施调控的。tet-off/tet-on系统是比较成熟的真核生物外源基因诱导表达系统之一,具有高效、无毒、开/关较严密等特点,已被成功地应用于细胞和转基因小鼠基因诱导表达的研究。
tet-off/tet-on的区别是tet-off与tet-on系统是同一系统的两个互补系统.在tet-off系统中,在缺少tc的情况下,tc-应答转录激活因子(tta)结合到四环素应答元件,激活基因的转录.当tc或者dox加到培养基时,转录停止.tet-on系统是建立在反向tta(rtta)的基础上的。
rtta与tta有四个氨基酸的区别，在dox的存在下激活转录.在组织培养的研究中,无论使用哪个系统,诱导4小时后表达就能被检测到,12-24小时达到高峰.为了有效的使用tet系统,我们必须选择高诱导表达目的基因,而且最低背景的双稳定细胞系.由于只须加入dox就能引进基因表达,所以tet-on系统是表达细胞毒性蛋白的最佳选择.反之,在没有诱导物的情况下,tet-off能明显的观察蛋白表达.
tet-off/tet-on的区别是tet-off与tet-on系统是同一系统的两个互补系统.在tet-off系统中,在缺少tc的情况下,tc-应答转录激活因子(tta)结合到四环素应答元件,激活基因的转录.当tc或者dox加到培养基时,转录停止.tet-on系统是建立在反向tta(rtta)的基础上的。
rtta与tta有四个氨基酸的区别，在dox的存在下激活转录.在组织培养的研究中,无论使用哪个系统,诱导4小时后表达就能被检测到,12-24小时达到高峰.为了有效的使用tet系统,我们必须选择高诱导表达目的基因,而且最低背景的双稳定细胞系.由于只须加入dox就能引进基因表达,所以tet-on系统是表达细胞毒性蛋白的最佳选择.反之,在没有诱导物的情况下,tet-off能明显的观察蛋白表达.
温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考
